實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：多酚氧化酶(PPO）測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
檢測方法：可見分光光度法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6420
產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：
測定意義: PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。 測定原理： PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌，后者在525nm有特征光吸收。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
500mL SDS-PAGE分離膠配膠液 SDS-PAGE Resolving Gel Buffer 4℃保存
2 ug pX260-U6-DR-BB-DR-Cbh-NLS-hSp-Cas9-NSL-H1-shortract-PGK-puro pX260-U6-DR-BB-DR-Cbh-NLS-hSp-Cas9-NSL-H1-shortract-PGK-puro 低溫運輸，-20℃保存
10次 植物mtDNAout
2 ug pETDuet-1 pETDuet-1 低溫運輸，-20℃保存
PALCAM瓊脂 PALCAM Agar 250g
5g D(+) 木糖 D(+)-Xylose 室溫干燥保存
1000支 10 μL RNase-free 白吸頭（袋裝帶芯） 常溫
48 T 琥珀酸脫氫測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
50T 志賀菌ipaH 基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法) 低溫運輸，-20℃保存
2mL UTP溶液，2.5mM
2 ug pLVX-mCherry-N1 pLVX-mCherry-N1 低溫運輸，-20℃保存
多酚氧化酶(PPO）測試盒可見分光光度法Rabbit Anti-chicken IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml
Socs 3 細胞因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.1ml
PAF 小板活化因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
BrdU(A7) 溴脫氧尿苷單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
Delta Opioid Receptor D型片受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
SODD Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
VLDL Receptor 極脂蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
Sema3F 臂板蛋白3F抗體 規(guī)格: 0.1ml
Leptin 瘦素抗體 規(guī)格: 0.1ml
MAGEB3 黑色素瘤相關(guān)抗原B3抗體 規(guī)格: 0.2ml
