細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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產(chǎn)品名稱 | 人肺腺鱗癌細(xì)胞 |
英文名稱 | NCI-H647 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
769-P人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSL-ASCORBICACID,FREEACID抗壞血酸(維生素C)ACS級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽)1-安基典 97% 1-cminopyridinium iodidq 692-87-0
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAh)(5×105) ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 Humanwo7iumCHLORIDE錄化鈉生物技術(shù)級(jí)白色精細(xì)顆粒粉末RTsigma
猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6AYEASTnitnOGENBASEWITHOUTAMINOACIDS酵母氮源(YNB), 不含基酸細(xì)菌學(xué)級(jí)米白色精細(xì)粉末RTsigma
9. 腎臟細(xì)胞系統(tǒng)4-甲基傘形酮葡萄糖苷酸培養(yǎng)基NA
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3鐿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl) Ytterbium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10%HCl
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 (HIBEC)( 5×105 )鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,溶劑:1%鹽酸)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,溶劑:1%鹽酸
CL-0059CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:1%鹽酸)Zinc standard質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸
小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P19 小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,溶劑:水) dodecylbenzenesulfonate solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,溶劑:水
HCT-8/FU 人結(jié)腸癌尿嘧啶耐藥株磺胺甲二唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfamethizole質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
人肺腺鱗癌細(xì)胞人角膜上皮細(xì)胞裂解物HCEpiCL促腎上腺皮質(zhì)激素(1-10),人ACTH (1-10), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CCL6 Others Mouse 小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-13),人ACTH (1-13), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
BEAS-2B 人支氣管上皮細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-16),人ACTH (1-16), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0166NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素(1-17),人ACTH (1-17), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24), 人ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
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