細(xì)胞接受后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的的*培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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產(chǎn)品名稱 | 人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
英文名稱 | HCAEC |
規(guī)格 | 詳見說明 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
腺苷酸環(huán)化酶9抗體
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白 (His 標(biāo)簽)M-MLVREVERSETRANSCRIPTASEM-MLV反轉(zhuǎn)錄酶FROZENsigma
WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞3-基四輕呋 3-MqTHYLTqTRcxy7noFURcN 1343-12-9
CM-R073大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL血清尿素氮測定試劑盒20片/箱
FGFR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) GENE-PAGEPLUS6%6% GENE-PAGE PLUS, 7 M 尿素生物技術(shù)級透明無色溶液COLDsigma
小鼠腦膜細(xì)胞MMenC105-59-9N-甲基二N-metxyldiethanolamine
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 那格列奈?;?/span>-β-D-葡萄糖苷酸Nateglinide Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL4-羥苯基馬拉維若4-Hydroxyphenyl Maraviroc質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
VERO E6細(xì)胞,猴腎細(xì)胞系 Lec1(卵巢細(xì)胞) 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]依澤替米貝酮Ezetimibe Ketone質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)3-O-乙酰依澤替米貝3-O-Acetyl Ezetimibe質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7依澤替米貝羥基β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe Hydroxy β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4,7-基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑碳酸氫鈉)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
HGC-27 人胃癌細(xì)胞(未分化)1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
HuT 78人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS1,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))1,4,7-Trithiacyclononane質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷-1,4,8,11-四乙酸四乙酯(>97.0%(GC))Tetraethyl 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane-1,4,8,11-tetraacetate質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
大鼠雪旺細(xì)胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 Human1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯(>93.0%(N))Tri-tert-butyl 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-triacetate質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N)
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