產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
產(chǎn)品名稱:Mycobacterium marinum
規(guī)格: 詳見說明
貨號:BK-P96818
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
注意事項:產(chǎn)品僅用于科研1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
鄰硝基本-α-D-半乳糖苷1公斤 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫試劑盒 Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
乙二醇雙[4-(乙氧羰基)基](>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether 英文名稱MouseEndothelialniicoxidesyhase3ELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)規(guī)格:96T/48T 大鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乙二醇雙(4-羧基)(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether βAMYLOID蛋白共沉淀分析試劑盒5 人胸腺肽β4(Thymosin β4)試劑盒 Human Thymosin β4 ELISA Kit
9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)基]芴(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene RabbieceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ab-IgG ELISA Kit
pre-ELM-11(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)pre-ELM-11 小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒 ,英文名: Orexin A ELISA Kit Ratlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性紫49質(zhì)量規(guī)格:IND,進分Acid Violet 49 ELISAKitADA人腺苷脫氨酶規(guī)格:48T/96T 尿游離皮質(zhì)醇(UFC)ELISA試劑盒 ,英文名: UFC ELISA Kit
皂黃質(zhì)量規(guī)格:ARMetanil yellow 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒 ,英文名: U-TSH ELISA Kit RabbieninELISA試劑盒兔腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
橙黃G;酸性橙10質(zhì)量規(guī)格:BSOrange G 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA檢測試劑盒RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人細菌(BV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
橙黃Ⅱ質(zhì)量規(guī)格:AROrangeⅡ 人白介素5(IL-5)試劑盒 Human IL-5 ELISA KIT HumanC-Polypeptide,CPELISAKit人C多肽(CP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Mycobacterium marinumEB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0910拓撲替康羧酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Topotecan Carboxylic Acid Salt
大鼠氣管上皮細胞;RTE 慢性髓原白血病細胞,K-562細胞 P3X63Ag8.653細胞,小鼠骨髓瘤細胞拓撲替康質(zhì)量規(guī)格:美國進口Topotecan
ACHN, 人腎細胞腺癌細胞 Human15-酮基氟前列醇異丙酯質(zhì)量規(guī)格:美國進口15-keto Fluprostenol isopropyl ester
CRTAM Others Human 人 CRTAM 人細胞裂解液
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。