免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
英文名稱 Anti-CD3E
中文名稱 CD3/CD3-ε 抗體說明書
別 名 CD 3E; CD3 epsilon; CD3 TCR complex; CD3E; CD3e antigen epsilon polypeptide (TiT3 complex); CD3E antigen epsilon polypeptide; CD3e molecule epsilon; CD3E_HUMAN; T cell antigen receptor complex epsilon subunit of T3; T cell surface antigen T3/Leu 4 epsilon chain; T cell surface antigen T3/Leu4 epsilon; T cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain precursor; T-cell surface antigen T3/Leu-4 epsilon chain; T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain; T3E; TCRE; TiT3 complex.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg 1ml/1mg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, ,MACFA
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞膜受體 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 20kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse CD3E C-terminus
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++”以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
豬谷氨半胱氨連接酶修飾亞(GCLM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒3,4-乙烯二氧噻吩D-木糖 超純級(jí), ≥99%鈦鋇 99.99% metals basis
豬血紅蛋白C(HbC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 對(duì)羥苯乙酯β-煙酰腺嘌呤二核苷磷 95%碳化 1-200目,98%
豬GDP解離抑制因子1(GDI1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒對(duì)羥苯乙酯叔丁氧羰肼 98%碳化 1-10 μm,98%
豬α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鈣乙肟 99%碳化 99%,50nm
豬組織蛋白酶D(CTSD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鈣烯 AR,99.0% (劇品)納米鈦鋇 99.9% metals basis,<100 nm
豬生長調(diào)節(jié)致癌因β(GROβ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 聚烯酯丁肟 99%碲化鉍(III) 99.99% metals basis
豬狀腺激素反應(yīng)因(THRSP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚烯酯乙酰乙叔丁酯 95%硫化鉍(III) 99%
豬早期生長應(yīng)答蛋白4(EGR4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒磷苯二鈉化亞銅 AR,99.5%氧化鈣 99.99% metals basis
豬FMS樣酪氨激酶3配體(Flt3L)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吖啶三硅烷 >98.0%(GC)硫化鎘 CP,95%
豬谷氨脫氫酶(GDH/GLDH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 吖啶鄰酚 AR,98%硫化鎘 AR,98%
豬黏膜地址素黏附分子(MAdCAM1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒吖啶間酚 CP硫化鎘 99.999%
豬信號(hào)素7A(SEMA7A)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒XTT 鈉鹽鄰苯二酚 AR,99.0%化鈰,無水 99.9% (REO)
豬內(nèi)皮素受體B(ETRB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒XTT 鈉鹽鄰苯二酚 CP,98.0%銅粒 99.99% metals basis,粒徑<5mm
豬白介素11(IL-11)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒噻吩-2-羧酰肼鄰苯二酚 standard for GC, ≥99.5% (GC)銅粉 99.8% metals basis,20μm
豬B淋巴激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒噻吩-2-羧酰肼2,6-二酚 99%硝銫 99.99%
豬心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 噻吩-2-羧酰肼2,6-二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品硝銫 AR,99.0%
CD3/CD3-ε 抗體說明書猴胃動(dòng)蛋白2(GKN2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒CCR1(Human CC-chemokine receptor 1 ELISA Kit 人CC趨化因子受體1
猴血小板因子4變種1(PF4V1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒CX3CR1(Human CX3C-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CX3C趨化因子受體1
猴I型膠原交聯(lián)羧端肽(CTXI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 PARC/CCL18(Human pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子
猴血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 MAdCAM-1(Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1) ELISA Kit 人黏膜地址素黏附分子
猴皮膚T淋巴相關(guān)抗原(CLA/CTAGE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 IFN- Beta/IFNB(Human Interferon Beta) ELISA Kit 人β干擾素
猴白介素1受體Ⅰ(IL1R1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒sCD38(Human Soluble Cluster of differentiation 38) ELISA Kit 人可溶性CD38
猴巨噬活化因子(MAF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 CR2/sCD21(Human Soluble Cluster of differentiation 21) ELISA Kit 人可溶性CD21
猴胰腺再生蛋白1α(REG1α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒sLR(Human Leptin Soluble Receptor) ELISA Kit 人可溶性瘦素受體