免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司抗體僅用于科研現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購(gòu)!
英文名稱 Anti-CK7
中文名稱 細(xì)胞角蛋白7抗體規(guī)格
別 名 Cytokeratin 7; CK 7; K7; Keratin 7; Keratin,type II cytoskeletal 7; KRT7; SCL; K2C7_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 54kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from the middle of human CK7
亞 型 IgG
免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++”以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
猴β-黑色素激素(βMSH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 二化鉑茄鏈格孢菌用途: 與紫穗槐共生固氮
猴蛋白激酶C-γ(PKCγ)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,5-吡啶二羧根瘤菌用途: 與白三葉草共生固氮
猴表皮生長(zhǎng)因子(EGF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,5-吡啶二羧三葉草根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,5-吡啶二羧平菇拉丁屬名: Escherichia coli
猴Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴噻吩大腸埃希氏菌拉丁屬名: gallinarum
猴趨化素樣因子超家族成員7(CKLFSF7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴噻吩雞傷寒沙門氏菌用途: 食用兼藥用
猴載脂蛋白H(ApoH)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-溴噻吩貝葉多孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴促胰液素(SCT)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴-4-氟苯樟疫霉用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物
猴血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-溴-4-氟苯鏈格孢菌拉丁屬名: Streptomyces albus subsp. albus
猴葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-溴-4-氟苯白色鏈霉菌白色亞種拉丁屬名: Enterobacter cloacae
猴激肽釋放酶6(KLK6)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氨-4-苯硫酚陰溝腸桿菌拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. oligosporus
猴白彈性蛋白酶(HLE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-氨-4-苯硫酚小孢根霉少孢變種拉丁屬名: Cellulomonas carbonis
猴磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,4,6-三氨嘧啶碳纖維單胞菌拉丁屬名: Enterobacter cloacae subsp. cloacae
猴蛋白C抑制劑(PCI)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,4,6-三氨嘧啶陰溝腸桿菌(陰溝腸桿菌陰溝亞種)拉丁屬名: Enterococcus faecalis
猴內(nèi)肽2(EM2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-吡啶糞腸球菌用途: 抗病性鑒定,抗病育種,分子標(biāo)記
猴小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒4-吡啶大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)規(guī)格: 凍干物
細(xì)胞角蛋白7抗體規(guī)格兔鳥苷酸交換因子(GEF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 FS(Human Follistatin) ELISA Kit 人卵泡抑素
兔腦多巴神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CDNF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 TAb(Human Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit 人甲狀腺素抗體
兔神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人兒茶酚
兔Preptin 蛋白(Preptin)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Cys-C(Human Cystatin C) ELISA Kit 人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C
兔輕肽鐵蛋白(FTL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰膽堿受體抗體
兔BTG3關(guān)聯(lián)核蛋白(BANP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羥色
兔核糖核酸酶III(RNASEN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 INH-A(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素A
兔絲氨酸/蘇氨酸激酶39(STK39)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白