常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細菌或細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
SP淀粉磷酸化酶測試盒微量法 | 100管/48樣 | 淀粉系列 | LZ-01693S |
商品介紹:
測定意義
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負責(zé)延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。
在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數(shù)量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。
測定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)檢測試劑盒乙鈉溶液(2mol/L,pH4.0,無菌)D- 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-(三氟) 97%
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)檢測試劑盒乙鈉溶液(3mol/L,pH4.8,無菌)BOC-L-苯氨 98.5%3-三氟 98%
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)檢測試劑盒乙鈉溶液(3mol/L,pH5.0,無菌)BOC-甘氨 99%四氫吡喃 97%
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)檢測試劑盒乙鈉溶液(3mol/L,pH5.4,無菌)BOC-L-脯氨 99%4-三氟酰 98%
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)檢測試劑盒乙鈉溶液(3mol/L,pH5.6,無菌)BOC-L-谷氨 98%對三氟 99%
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)檢測試劑盒乙鈉溶液(3mol/L,pH6.0,無菌)BOC-L-亮氨 98.5%3-(三氟)苯 97%
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)檢測試劑盒乙鈉溶液(3mol/L,pH7.0,無菌)BOC-L-纈氨 99% USP級
大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)檢測試劑盒乙鈉緩沖液(0.1mol/L,pH3.6-5.6)芐酯 96%胃(豬源) 1:3000
大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)檢測試劑盒乙鈉緩沖液(0.2mol/L,pH3.6-5.8)BOC-β-氨 98%(豬胰臟) 1:250
大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)檢測試劑盒蔗糖溶液(30%)叔丁氧羰-L-天冬氨-4-叔丁酯 99%化亞銅 AR,97%
大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)檢測試劑盒蔗糖溶液(50%)N-叔丁氧羰-L-谷氨5-芐酯 97%化亞銅 CP,93%
大鼠層連蛋白/板層素(LN)檢測試劑盒蔗糖溶液(1mol/L)N-Boc-L-天冬氨-5-叔丁酯 98%化亞銅 99.999% metals basis
大鼠層連蛋白/板層素(LN)檢測試劑盒蔗糖溶液(2mol/L)BOC-D-谷氨5-叔丁酯 98%化亞銅 ≥99.95% metals basis
大鼠白介素6(IL-6)檢測試劑盒 動物灌注液Boc-組氨 99%槲皮素,二水 97%
大鼠白介素6(IL-6)檢測試劑盒 Walpole乙緩沖液(0.01mol/L,pH3.373-6.777)Boc-D-異亮氨 98%槲皮素 97%
大鼠白介素4(IL-4)檢測試劑盒Walpole乙緩沖液(0.2mol/L,pH2.696-6.518)N-叔丁氧羰-賴氨酯 98.5%槲皮素,二水 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% (HPLC)
SP淀粉磷酸化酶測試盒微量法雙(2-基)二硫 98%木犀草苷 ≥98.0% (HPLC) Beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
4,4'-二氯二二硫 98%梓 ≥97% (HPLC)Beta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)
二芐基二硫 98%β-胡蘿卜 96%A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40
4,4'-二甲氧基二二硫 97%姜黃 ARA Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀粉樣肽1-40(結(jié)構(gòu)改造)
芐基基硫 98%姜黃 98%A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀粉樣肽29-40(野生型)
3-溴硫代甲 98%姜黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀粉樣肽29-42(野生型)
2-溴茴香硫 98%班蝥 98%Beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)(多肽蛋白)
4-溴茴香硫 98%班蝥 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉樣肽25-35(多肽)