常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) | 貨號(hào) |
αKGDHα酮戊二酸脫氫酶測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 氧化磷酸化系列 | LZ-01571S |
商品介紹:
測(cè)定意義
α-KGDH(EC 1.2.4.2)廣泛存在于動(dòng)物、植物微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是三羧酸循環(huán)調(diào)控關(guān)鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰。
測(cè)定原理
α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和生成琥珀酰、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)檢測(cè)試劑盒不銹鋼試管帽2,5-二溴-3-十二烷噻吩 97%2-(三氟)苯肼鹽鹽 98%
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)檢測(cè)試劑盒不銹鋼試管帽3-十二烷噻吩 98%3-(三氟)苯肼鹽鹽 98%
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)檢測(cè)試劑盒洗耳球2,5-二溴-3-丁噻吩 96%對(duì)苯肼鹽鹽 98%
小鼠質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)檢測(cè)試劑盒洗耳球(1,1'-雙(二苯膦)二茂鐵)二化鎳 97%2-乙酰苯 97%
小鼠質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)檢測(cè)試劑盒洗耳球1,2-雙(二苯膦)乙烷化鎳 98%N-叔丁氧羰-1,3-二 98%
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒 篩網(wǎng)二苯-2-吡啶膦 97%2-溴-N,N-二 98.0 %
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒 篩網(wǎng)2,7-二叔丁芴 98%(4-羧丁)三苯溴化膦 98.0%
小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)二苯并噻吩砜 97%三氟磺酯 97%
小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)2,2’-二溴-9,9’-螺二芴 95%1-癸烷磺鈉 for Ion pair chromatography,≥99.0%
小鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)9,9-二芴 98%四庚 PIC
小鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)9,9-二芴 99%4-溴 99%
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)2,7-二溴-9,9-雙十二烷芴 97%2-溴 98%
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)3,6-二溴咔唑 98%二芐 99%
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)二叔丁化膦 96%3,5-二芐溴 98%
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測(cè)試劑盒篩網(wǎng)二溴雙(三苯磷)化鎳 99%二苯乙 98%
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)檢測(cè)試劑盒不銹鋼藥勺4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑 98%四庚 PIC
αKGDHα酮戊二酸脫氫酶測(cè)試盒微量法碳酐相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體Human EPS8(Epidermal growth factor receptor kinase substRate 8) ELISA Kit腫瘤血管生長(zhǎng)因子(TAF)ELISA試劑盒, TAF ELISA kit
白介-18受體α鏈抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒, pRB ELISA kit
轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit阿米巴(Amebiasis)ELISA試劑盒,Amebiasis ELISA
TCD1抗體Human IFNA21(IFN alpha 21) ELISA Kit組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒,histon-H2b ELISA
磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human ProCollagen II ELISA Kit果糖1,6二磷醛縮(FDA)ELISA試劑盒,
網(wǎng)格蛋白重鏈抗體Human ALD(Aldosterone) ELISA Kit甘露糖(MN)ELISA試劑盒,
透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體Human Aldolase B ELISA Kit小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒,
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human IFNA21(IFN alpha 21) ELISA Kit大鼠纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒,