商品介紹:
測(cè)定意義
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋(píng)果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。
測(cè)定原理:
MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
MDHm線粒體蘋(píng)果酸脫氫酶測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 三羧酸循環(huán)系列 | LZ-01585S |
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
小鼠17羥孕(17-OHP)檢測(cè)試劑盒試劑瓶3,3-二聯(lián)苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 Standard for GC, >99.5% (GC)
小鼠卵泡抑素(FS)檢測(cè)試劑盒試劑瓶二乙錫 分析標(biāo)準(zhǔn)品,10ng/μl溶于環(huán)己烷乙 重蒸餾, ≥99.5%
小鼠卵泡抑素(FS)檢測(cè)試劑盒試劑瓶磺達(dá)氟沙星 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 99%,培養(yǎng)
小鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)檢測(cè)試劑盒培養(yǎng)瓶枯莠隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 ACS, ≥99.0%
小鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)檢測(cè)試劑盒培養(yǎng)瓶特樂(lè)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙二單己 98%
小鼠雌三(E3)檢測(cè)試劑盒培養(yǎng)瓶直接黑38 Dye content,≥45 %乙二單己 99%
小鼠雌三(E3)檢測(cè)試劑盒試劑瓶順式-5,8,11,14,17-二十碳五烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙二丁 AR,99.0%
小鼠雄烯二(ASD)檢測(cè)試劑盒試劑瓶 分析標(biāo)準(zhǔn)品間苯二 AR
小鼠雄烯二(ASD)檢測(cè)試劑盒試劑瓶EPA 鄰苯二酯混標(biāo)317個(gè)品種1000ng/μl,溶劑:正己烷丁錫 Sn 56.5%±0.5%
小鼠游離睪(F-TESTO)檢測(cè)試劑盒烘口試管 分析標(biāo)準(zhǔn)品異丁 for HPLC, ≥99.5%
小鼠游離睪(F-TESTO)檢測(cè)試劑盒羅口試管 膠木塞芬苯達(dá)唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品異丁 ACS, ≥98.5%
小鼠睪(T)檢測(cè)試劑盒具塞試管非草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品異丁 >99.5%(GC)
小鼠睪(T)檢測(cè)試劑盒圓口離心管伏草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品異丁 CP,98.0%
小鼠孕激素/孕(PROG)檢測(cè)試劑盒 羅口離心管鹽呋喃它 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%異丁 AR,99.0%
小鼠孕激素/孕(PROG)檢測(cè)試劑盒 具塞離心管鹽呋喃它異丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配(sRANKL)檢測(cè)試劑盒羅口離心管赤霉素 分析標(biāo)準(zhǔn)品新戊二 99%
MDHm線粒體蘋(píng)果酸脫氫酶測(cè)試盒微量法胎盤(pán)蛋白14抗體Anti-CD163 Antibody水痘帶狀皰疹病PCR檢測(cè)試劑盒
磷激α1抗體Anti-CD151 Antibody豬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
磷化激γ1Anti-CD160 Antibody乳桿PCR檢測(cè)試劑盒
親環(huán)相關(guān)蛋白1抗體Anti-CD163 Antibody犬鉤端螺旋體PCR檢測(cè)試劑盒
磷化激γ2Anti-CD163 Antibody肥胖易感基因825TPCR測(cè)定試劑盒規(guī)格
肝糖原磷化抗體Anti-CD163 Antibody豬托克特諾病PCR檢測(cè)試劑盒
肌肉糖原磷化抗體Anti-CD19 Antibody羊偽結(jié)核棒狀桿PCR檢測(cè)試劑盒
磷羧化2抗體Anti-CD1B Antibody犬瘟熱病RT-PCR檢測(cè)試劑盒