Cell Meter細(xì)胞內(nèi)熒光法過氧化氫檢測試劑盒 是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測過氧化物的試劑盒，過氧化氫是一種活性氧代謝副產(chǎn)物，可作為許多氧化應(yīng)激相關(guān)狀態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。 它涉及許多與哮喘，動脈粥樣硬化，糖尿病血管病變，骨質(zhì)疏松癥，許多神經(jīng)退行性疾病和唐氏綜合癥有關(guān)的生物學(xué)事件。 這種活性物質(zhì)的測量有助于確定氧化應(yīng)激如何調(diào)節(jié)各種細(xì)胞內(nèi)途徑。 Cell Meter 細(xì)胞內(nèi)熒光過氧化氫檢測試劑盒使用我們*的OxiVision Blue過氧化物來定量活細(xì)胞中的過氧化氫。 OxiVision 藍(lán)色過氧化物具有細(xì)胞滲透性，當(dāng)與過氧化氫反應(yīng)時會產(chǎn)生藍(lán)色熒光。 該試劑盒提供了一種監(jiān)測活細(xì)胞中過氧化氫水平的敏感工具，并且它被優(yōu)化用于流式細(xì)胞術(shù)。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Cell Meter細(xì)胞內(nèi)熒光法過氧化氫檢測試劑盒 。
樣品實驗方案
簡要概述
1.在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞
2.用OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器染色細(xì)胞
3.用測試化合物處理細(xì)胞
4.使用流式細(xì)胞儀Pacific Blue Channel監(jiān)測熒光強度（Ex / Em = 405/450 nm）
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器原液：
將100μLDMSO（組分B）加入到OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器（組分A）的小瓶中，并充分混合。 注意：1μL重組的OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器原液足以容納0.5 mL細(xì)胞。 應(yīng)立即使用原液,避光。
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樣品分析
1.用OxiVision 藍(lán)色過氧化物傳感器儲備液在培養(yǎng)基或37°C所需緩沖液中染色細(xì)胞20-30分鐘，避光。
2.用測試化合物在培養(yǎng)基或37℃的所需緩沖液中處理細(xì)胞一段所需的時間。對于對照樣品（未處理的細(xì)胞），加入相應(yīng)量的化合物緩沖液。注意：建議在培養(yǎng)基中處理細(xì)胞。然而，如果測試的化合物對血清敏感，則可以在前吸出生長培養(yǎng)基和血清因子。在抽吸后，將細(xì)胞重懸于1X Hank鹽溶液和20mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的緩沖液中。或者，可以在無血清培養(yǎng)基中處理細(xì)胞。注意：我們用培養(yǎng)基中的100μM過氧化氫在37°C處理Jurkat細(xì)胞90分鐘以誘導(dǎo)過氧化氫。詳細(xì)信息請參見圖1。
3.使用流式細(xì)胞儀監(jiān)測太平洋藍(lán)色通道（Ex / Em = 405 / 450nm）的熒光強度。
