大腸菌群檢驗紙片-Ⅲ
產(chǎn)品編號：060050
規(guī) 格：10份/盒(9袋/份)
適用范圍：廣泛應(yīng)用于食品、飲料飲用純凈水中的大腸菌群的檢測。
檢驗方法：(參考GB 4789.3-2003)
樣品處理：
以無菌操作將檢樣25ml(或25g)放于含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體樣品用均質(zhì)器，以8000～10000r/min的速度處理1min,做成1：10的均勻稀釋液;用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，制成1：100的均勻稀釋液;按上一步操作依次做10倍遞增稀釋液。
② 接 種：
根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準要求或?qū)颖疚廴厩闆r的估計，選擇適宜稀釋度的稀釋液，吸取三份10 mL分別涂布于3袋大紙片;三份1 mL分別涂布于3袋小紙片;另取1 mL再稀釋10倍后，吸取三份1 mL分別涂布于3袋小紙片。而后用手將檢驗紙片輕輕壓平，袋口朝上豎直放置于恒溫培養(yǎng)箱(35～37℃)內(nèi)培養(yǎng)18～24h，然后觀察結(jié)果。
③ 結(jié)果判斷：
陰性結(jié)果：紙片保持紫藍色不變，無論有否紅色斑點或紅暈均判為大腸菌群陰性。
陽性結(jié)果：紙片上呈現(xiàn)紅色斑點或紅暈，其周圍變黃或整個紙片變黃均判為大腸菌群陽性。
④ 結(jié)果報告：
根據(jù)陽性反應(yīng)的紙片數(shù)查相應(yīng)的大腸菌群MPN表，得數(shù)據(jù)乘以稀釋倍數(shù)，以此為結(jié)果，報告每100mL(g)檢樣內(nèi)大腸菌群的MPN值(見附表)
注意事項：
1、 應(yīng)避光低溫(10℃以下)保存，并注意防潮，如發(fā)現(xiàn)紙片變?yōu)榉奂t色即為失效。
2﹑ 檢查食(飲)品時，凡酸性檢樣應(yīng)以100g/L無菌碳酸鈉溶液調(diào)pH至中性后，方可進行稀釋接種。
3、 可疑結(jié)果的判斷：
大腸菌群菌量的多少與結(jié)果的顯示密切相關(guān)，可出現(xiàn)3種不同現(xiàn)象:(1) 菌量較大(≥103cfu/mL)，整個紙片變黃而又無紅色斑點(或紅暈);(2) 菌量適中(102~103 cfu/mL)，整個紙片也變黃，但有小而密集的紅色斑點;(3) 菌量較少(≤102 cfu/mL)，紙片可呈紫藍色，并有散在或較密集的紅色斑點，其周圍變黃。因此菌量較大時，可能出現(xiàn)可疑現(xiàn)象。此時應(yīng)通過加大樣品稀釋度或進一步做復(fù)發(fā)酵進行證實。其它可疑現(xiàn)象也可通過復(fù)發(fā)酵實驗進行確認。
4 、 確認試驗的方法：
進行確認試驗，用滅菌攝子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發(fā)酵管里，置37 ℃ 24小時培養(yǎng)后，對其產(chǎn)酸產(chǎn)氣者判為大腸菌群陽性，否則判為陰性。
附表：
大腸菌群最可能數(shù)(MPN)檢索表(總接種量33.3ml,其中3份10ml水樣，3份1ml水樣，3份0.1ml水樣)
