免疫原
klh偶聯(lián)肽來源于擬南芥PCaP1序列UniProt: Q96262, TAIR: At4g20260
主機(jī)的兔子
單克隆多克隆
純度血清
格式凍干
數(shù)量100µl
重建時加入無菌水100µl
凍干/復(fù)配保存于-20°C;請記住,在打開管子之前,要簡短地旋轉(zhuǎn)管子,以避免凍干材料粘在管帽或管邊可能發(fā)生的任何損失
Western blot (WB)
推薦稀釋1:20 00 (WB)
預(yù)計|明顯MW 24,5 | 36 kDa
證實敲除突變體(SALK_022955, Col-0背景)沒有PCaP1的mRNA或蛋白。在免疫印跡中,對野生型和pcap1敲除突變體植物的粗膜組分進(jìn)行了檢測。因此,PCaP1抗體可以特異性識別PCaP1,并可用于免疫印跡。為了應(yīng)用于免疫細(xì)胞化學(xué),Rubisco附近的交叉反應(yīng)帶必須通過抗體與帶背景帶的部分膜孵育來去除。
粗膜制備規(guī)程
該方案將有助于從非常少量的植物組織中制備粗膜組分。
(1)用不含SDS的緩沖液均勻化根或根尖。
(2)將勻漿在Eppendorf管中以2 000 rpm離心2min,除去細(xì)胞壁、細(xì)胞核、質(zhì)體和線粒體。
(3)取上清,30 000 g離心20 min,分離可溶性組分。請使用足夠的試管進(jìn)行超離心。
(4)用DTT或β -巰基乙醇的SDS緩沖液懸浮得到的沉淀(粗膜)。
(5)將步驟(4)得到的樣品溶液在70℃下加熱5分鐘。
(6)將變性后的樣品進(jìn)行SDS-PAGE檢測