色譜柱的使用：
色譜柱是昂貴的色譜耗材，正確的使用和維護(hù)對保證色譜柱的正常使用和延長壽命至關(guān)重要。
1、色譜柱使用前注意事項(xiàng)：
○1色譜柱內(nèi)的存儲液：
色譜柱看的存儲液，如沒有特殊說明均為質(zhì)檢報(bào)告中所述流動相，
氨基（NH2）、氰基（CN）、硅膠柱（SiO2）均為正相條件–正己烷/異丙醇體系，反相柱（C1、C4、C8、C18、苯基Phenyl）均為甲醇/水體系，檢測前，請用相互溶的試劑將其替換；
○2新色譜柱的平衡：
新反相色譜柱：用純甲醇沖洗色譜柱30個柱體積，再更換成能與檢測流動相互溶的流動相沖洗30個柱體積，最后用流動相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn)；
新的正相色譜柱：用異丙醇0.5ml/min沖洗30個柱體積，再更換成檢測流動相穩(wěn)定系統(tǒng)至基線平穩(wěn)；
○3流動相和樣品保持潔凈：
由于懸浮在樣品或流動相中的細(xì)小顆粒會堵塞色譜柱兩端的篩板，各種試劑盡量使用色譜純級的，用量少的試劑純度至少是分析純，水是超純水和全玻璃器皿雙蒸水，使用前建議用0.45μm的濾膜過濾；樣品溶液使用針筒過濾；
樣品中的雜質(zhì)是造成色譜柱污染、柱效下降的最主要原因之一，復(fù)雜樣品可選樣品預(yù)處理柱（SPE柱）進(jìn)行樣品處理，如果不方便處理，使用相匹配的保護(hù)柱，樣品溶劑與流動相要相匹配，不能出現(xiàn)樣品不互溶，極性相差太大等想象，否則會造成色譜峰形變差，鬼峰等現(xiàn)象，使用流動相溶解樣品能有效的避免上述情況發(fā)生；
○4色譜柱允許使用的pH范圍：
每款色譜柱都有自己特定允許使用的pH范圍，請仔細(xì)對照你的色譜柱的使用pH范圍，在pH范圍以外使用，會使硅膠基質(zhì)溶解或鍵合相水解，對色譜柱造成不可恢復(fù)的損傷，如果在臨界pH處使用，分析結(jié)束后立即用適合于色譜柱保存并與當(dāng)前使用的流動相互溶的淋洗液置換掉。
表一

色譜柱型號	C8	C18	NH	CN
pH耐受范圍	2-10.0	2-10.0	1.5-9	1.5-8.5

色譜柱的保存：
○1短時間保存：使用間隔不超過四天，色譜柱按平時維護(hù)程序沖洗至基線平穩(wěn)，反相色譜柱保存在不帶有緩沖鹽、離子對試劑的有機(jī)相/水溶液中，有機(jī)相不低于20%；正相色譜柱正相使用保存在純正己烷中，反相使用保存在純有機(jī)溶劑中；并將隨柱的塑料堵頭旋緊密封。
○2長期保存：反相色譜柱保存在80%甲醇或80%乙腈水溶液中；正相色譜柱正相使用保存在純正己烷中，反相使用時需將柱內(nèi)存儲液用異丙醇置換，最后用正己烷保存；將色譜柱從儀器上取下，并將隨柱的塑料堵頭旋緊密封。
色譜柱的維護(hù)：
1、柱壓升高是每個色譜工作者都很頭疼的問題，長時間使用造成柱壓的緩慢升高通常是正常現(xiàn)象；短時間甚至是突然的柱壓升高通常是異常升高，排除儀器的故障，確定是色譜柱自身原因，一般有以下幾點(diǎn)：
○1柱頭的過濾篩板污染（固體顆粒物堵塞、強(qiáng)保留物質(zhì)累積）：
解決方法：
a、在柱前端加上在線過濾器或保護(hù)柱，用甲醇/水=20/80 1.0ml/min反向沖洗色譜柱180min；
b、在柱前端加上在線過濾器或保護(hù)柱，反向使用；
c、可將柱頭打開，將色譜柱頭中過濾篩板取出，在稀硝酸溶液內(nèi)超聲清洗20min，純水超聲清洗20min，最后用甲醇超聲清洗20min，重新裝入色譜柱；
○2柱頭填料污染（固體顆粒物堵塞、強(qiáng)保留物質(zhì)累積）：
解決方法：
a、用可以溶解污染物的溶劑較長時間（180min）反向沖洗色譜柱；
b、可將柱頭打開，小心取出被污染的填料，用相同的填料重新裝入修復(fù)；
○3pH使用不當(dāng)造成的損傷：
解決方法：
pH使用不當(dāng)造成固定相的缺失或塌陷，很難使色譜柱恢復(fù)，只能更換色譜柱。
2、使用保護(hù)柱和在線過濾器：
樣品和流動相中不能*過濾掉及泵磨損、密封圈和管路老化產(chǎn)生的固體顆粒物，進(jìn)入到色譜柱中就會堵塞篩板，導(dǎo)致柱壓升高，柱效下降，保護(hù)柱和在線過濾器上都有篩板，孔徑與分析柱的孔徑相同，能阻止顆粒物到達(dá)色譜柱，在分析故障中，柱壓升高占很大比例，因此建議您在色譜柱前端加上在線過濾器或者保護(hù)柱；
3、緩沖鹽的正確使用：
     緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑，其使用不當(dāng)會析出，加快泵柱塞桿和密封圈，流通閥的磨損，堵塞色譜柱頭篩板，填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的間隙，使填料板結(jié)柱壓升高，阻礙基質(zhì)上鍵合相的碳鏈自由舒展，使色譜柱保留能力下降，柱效降低，縮短其使用壽命，緩沖鹽析出后很難去除，因此正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱的使用壽命非常重要，具體方法如下：
☆使用前過渡。使用后沖洗
○1等度條件：分析前后用過渡流動相沖洗柱體積不少于20-30個柱體積，或分析完成后用過渡流動相以0.2ml/min（根據(jù)柱規(guī)格調(diào)整）沖洗過夜；
○2梯度條件：分析前，用與初始流動相組成相同的流動相以分析流速沖洗色譜柱不少于20-30個柱體積，分析后，用該過渡流動相沖洗色譜柱不少于20-30個柱體積，且梯度盡量平緩，避免緩沖鹽析出。
*過渡流動相：有機(jī)相和水相的比例和分析流動相中兩相比例一致或者水相比例高于分析流動相，不含緩沖鹽。
○3避免強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱保留：強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，是一個緩慢的過程，一段時間后會對樣品成分產(chǎn)生額外的保留行為，引起峰變寬，拖尾，使柱效下降，保留時間變化，到一定程度時會導(dǎo)致柱壓升高，對許多樣品特別是復(fù)雜樣品很難判斷其是否含有強(qiáng)保留物質(zhì)，因此要預(yù)防這一切的方式，堅(jiān)持每天分析完成后用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上
清洗方法：
a、未使用緩沖鹽，每天分析完成后用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上；
b、使用緩沖鹽，用上述方法去除緩沖鹽后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上；
*注意：不要輕易打開柱頭，因?yàn)橹^一旦打開，很難恢復(fù)到新柱的水平，因?yàn)橹^打開而造成的檢測后果，客戶自行負(fù)責(zé)。