Countess II FL細(xì)胞計(jì)數(shù)儀特點(diǎn):
1. 處理時(shí)間:約10秒即可精確完成細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)胞內(nèi)至多2種熒光的定量測(cè)定,并提供細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞活率、細(xì)胞直徑、直徑分布圖、熒光分布圖和細(xì)胞圖片等數(shù)據(jù)
2. 對(duì)焦方式:自動(dòng)對(duì)焦和手動(dòng)對(duì)焦2種方式供實(shí)驗(yàn)者選擇
3. 具有門控功能:可調(diào)節(jié)細(xì)胞的亮度、直徑、圓度和熒光閾值等參數(shù),對(duì)感興趣的細(xì)胞群進(jìn)行計(jì)數(shù)或熒光定量
4. 細(xì)胞樣品范圍:1 x 104-1 x 107個(gè)細(xì)胞/ml
5. 細(xì)胞樣品的大?。?-60 µm
6. 樣品量:10 µl,節(jié)約寶貴的細(xì)胞樣品
7. 光學(xué)系統(tǒng):3通道(明場(chǎng)+2個(gè)EVOS® LED光立方插槽),有多種熒光光源可供選擇,可根據(jù)應(yīng)用需求同時(shí)選配至多2種熒光光源
8. 可兼容一次性玻片和可重復(fù)使用的玻片
9. 程序:已經(jīng)預(yù)設(shè)好計(jì)數(shù)程序并已校準(zhǔn),每次軟件升級(jí)后需進(jìn)行一次校準(zhǔn)。
10. Countess自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀配有攝像頭(2.5X光學(xué)放大和500萬(wàn)像素)
對(duì)應(yīng)于Countess II FL細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上常用的染料的熒光光立方
光立方 | 激發(fā)光譜(nm) | 發(fā)射光譜(nm) | 常用的相容染料/熒光蛋白 |
---|---|---|---|
DAPI | 357/44 | 447/60 | DAPI, Hoechst, BFP |
TagBFP | 390/18 | 447/60 | TagBFP |
CFP | 445/45 | 510/42 | ECFP, Lucifer Yellow |
GFP | 470/22 | 510/42 | GFP, Alexa Fluor® 488, SYBR® Green, FITC |
YFP | 500/24 | 524/27 | EYFP, acridine orange (+DNA) |
RFP | 531/40 | 593/40 | RFP, Alexa Fluor® 546, Fluor® 555, Cy®3, DsRed, Rhodamine Red, dTomato |
Texas Red® | 585/29 | 624/40 | Texas Red®, Alexa Fluor® 568, Alexa Fluor® 594, MitoTracker® Red, mCherry |
Cy®5 | 628/40 | 692/40 | Alexa Fluor® 647, Alexa Fluor® 660, DRAQ5® |
Cy®5.5 | 655/46 | 794/16 | Cy®5.5 |
可重復(fù)使用或一次性玻片
一次性玻片和槍頭的安裝成本使得很多實(shí)驗(yàn)室打消了了停用繁瑣的手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的念頭。為此,Countess II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用了可選配可重復(fù)使用的玻璃玻片的設(shè)計(jì),從而顯著降低了自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的長(zhǎng)期耗材成本。而針對(duì)那些希望享受到一次性玻片便利的研究人員, Countess II FL細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
也支持使用針對(duì)原版Countess®細(xì)胞計(jì)數(shù)儀開(kāi)發(fā)的同款PMMA塑料玻片。
細(xì)胞成塊
采用Countess® II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀時(shí)這也不是問(wèn)題。無(wú)論您采用自動(dòng)還是手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,在對(duì)含有成塊細(xì)胞的樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),都難以獲得精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。而Countess® II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的*計(jì)數(shù)算法可以清晰地細(xì)胞塊內(nèi)的細(xì)胞邊界,因而即使是成團(tuán)塊樣品也可進(jìn)行精確、精密的細(xì)胞計(jì)數(shù)。
自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù) – 即便面對(duì)成塊樣品時(shí)。在含有0.4%臺(tái)盼蘭染色劑溶液的懸液中將NIH/3T3細(xì)胞按照1:1的比例混合,然后取10 μL的樣品加入到腔室玻片上并將玻片插入到Countess® II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀中。Countess® II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的分割和計(jì)數(shù)算法可以對(duì)細(xì)胞塊進(jìn)行解析,并根據(jù)臺(tái)盼藍(lán)排除法進(jìn)行活/死細(xì)胞評(píng)分。在本實(shí)驗(yàn)之中的樣品之中,共計(jì)數(shù)出了3.09 x 106的活細(xì)胞(不含臺(tái)盼藍(lán)染色劑)和5.86 x 103的死細(xì)胞(積聚了臺(tái)盼藍(lán)染色劑)。