一、物質(zhì)含量分析
基本原則:藥品的含量或效價(jià)是評(píng)定藥品的主要指標(biāo)之一,其測(cè)定方法,應(yīng)根據(jù)藥品特性、劑型、處方、鑒別試驗(yàn)和純度檢查綜合考慮,要保證測(cè)定方法具有一定的專屬性,更加注重準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性以及可重復(fù)性。
1、紫外可見(jiàn)光光度法
紫外可見(jiàn)光光度法是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)波長(zhǎng)為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法,該方法操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。常用的儀器為紫外可見(jiàn)光光度計(jì),該儀器操作相對(duì)簡(jiǎn)單,成本較低,但由于儀器方法的原因,易產(chǎn)生干擾從而影響測(cè)量準(zhǔn)確值。在制藥實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用于測(cè)量活性物質(zhì)含量、類化合物的含量以及確認(rèn)有害元素的限度等。
案例1:分光光度法測(cè)定中總黃酮的含量。
本案例是運(yùn)用紫外可見(jiàn)光光度法測(cè)定中藥材中有效物質(zhì)的含量。需求設(shè)備:美析紫外可見(jiàn)光光度計(jì)UV-1900。
案例2:紫外可見(jiàn)光分光光度法測(cè)定水中的鐵含量
本案例是運(yùn)用紫外可見(jiàn)光光度法測(cè)定水中的金屬元素含量。需求設(shè)備:美析紫外可見(jiàn)光光度計(jì)UV-1500。
2、高效液相色譜法
高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。一般的為紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器,將各成分進(jìn)行分離后,實(shí)現(xiàn)了單位時(shí)間內(nèi)分析的專屬性,從而保證了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外檢測(cè)器還包括二極管陣列檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、差示折光檢測(cè)器、蒸發(fā)光檢測(cè)器以及質(zhì)譜檢測(cè)器等,擴(kuò)大了高效液相色譜法可分析物質(zhì)的范圍。
案例1:高效液相色譜法測(cè)定的含量。
本案例是運(yùn)用高效液相色譜法測(cè)定西藥中活性成分的典型案例。需求設(shè)備:島津LC-20AT高效液相色譜儀;依利特P1201高效液相色譜儀。
案例2:高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定中人參皂苷Rg1 、Re 、Rb1 與三七皂苷R1 含量。
本案例是運(yùn)用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定中藥中幾種有效成分的成功案例。需求設(shè)備:島津LC-2030高效液相色譜儀;依利特P230高效液相色譜儀。
案例3:高效液相色譜法-熒光檢測(cè)器同時(shí)檢測(cè)龍眼中多菌靈和噻菌靈殘留
本案例是運(yùn)用高效液相色譜法并加用熒光檢測(cè)器測(cè)定農(nóng)藥殘留的運(yùn)用案例。需求設(shè)備:沃特世2695高效液相色譜儀+沃特世2596熒光檢測(cè)器;依利特P230高效液相色譜儀+依利特LIFD230熒光檢測(cè)器。
案例4:示差折光高效液相色譜法測(cè)定中的糖
本案例是運(yùn)用高效液相色譜法并加用示差折光檢測(cè)器測(cè)定紫外吸收不明顯的物質(zhì)含量。需求設(shè)備:安捷倫1260高效液相色譜儀+安捷倫1200示差折光檢測(cè)器;依利特P230高效液相色譜儀+依利特RI230示差折光檢測(cè)器。
案例5:高效液相色譜法-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法測(cè)定紅參及育精膠囊中人參皂苷Rg1 和Re 的含量
本案例中,是運(yùn)用高效液相色譜法加蒸發(fā)光檢測(cè)器檢測(cè)有紫外吸收的物質(zhì)含量,能夠降低較低紫外吸收波長(zhǎng)(203nm)造成的結(jié)果偏移。需求設(shè)備:安捷倫1260高效液相色譜儀+安捷倫1260蒸發(fā)光散射檢測(cè)器;島津LC-2030高效液相色譜儀+上海通微ELSP-UM-5000蒸發(fā)光檢測(cè)器。
案例6:超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在中藥指紋圖譜中的應(yīng)用
本案例中,詳細(xì)綜述了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)在中藥分離鑒別中的應(yīng)用。需求設(shè)備:島津LCMS8050;安捷倫6495。
3、氣相色譜法
氣相色譜法就是移動(dòng)相為氣體,根據(jù)所用固定相的不同可分為兩類:固定相是固體的,稱為氣固色譜法;固定相是液體的則稱為氣液色譜法。均利用移動(dòng)相在固定相中的被吸附強(qiáng)度差別或者分配能力不一,將成分分離,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)了分析的專屬性。氣相色譜法中可以使用的檢測(cè)器有很多種,有火焰電離檢測(cè)器(FID)與熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD),此外好包括質(zhì)譜檢測(cè)器等。
案例1:氣相色譜技術(shù)在中藥農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用
本案例中,詳細(xì)綜述了氣相色譜技術(shù)在中藥中測(cè)量農(nóng)藥殘留方面的應(yīng)用。需求設(shè)備:島津GC-2010 plus;儀盟A90;上海恒平GC-1120。
案例2:氣相色譜法同時(shí)測(cè)定中麝香酮、龍腦、樟腦、異龍腦的含量
本案例中,運(yùn)用氣相色譜法測(cè)量產(chǎn)品中的揮發(fā)性成分。需求設(shè)備:安捷倫7890氣相色譜儀;
案例3:氣相色譜法/三重四極桿質(zhì)譜測(cè)定番茄醬中72種農(nóng)藥殘留量
本案例中,運(yùn)用氣象色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),大通量的測(cè)量若干種農(nóng)藥殘留量。需求設(shè)備:安捷倫7000系列三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀
4、熒光分光光度法
熒光分光光度法是利用物質(zhì)的熒光特性,來(lái)進(jìn)行的定性或定量測(cè)量方法,熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡(jiǎn)便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn),可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無(wú)機(jī)化學(xué)等領(lǐng)域。
案例1:熒光光度法測(cè)定類抗生素含量
本案例闡述了熒光光度法在藥物成分含量測(cè)定方面的應(yīng)用。需求設(shè)備:天瑞儀器SUPER XRF 1050熒光光譜儀;
案例2:原子熒光光譜法測(cè)定中藥材中汞的可行性研究
本案例闡述了原子熒光光譜法在微量元素含量分析方面的應(yīng)用。需求設(shè)備:北分瑞利AF-630A原子熒光光譜儀;