人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒
HyCyteTM 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒
Human Umbilical Cord Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit
貨號(hào):UCHX-D101
規(guī)格:200 mL/Kit
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒產(chǎn)品性能穩(wěn)定,可提高臍帶/臍血間充質(zhì)干細(xì)胞成骨/成脂/成軟骨誘導(dǎo)效率;
NOTE:
a. 本產(chǎn)品組分均為無菌分裝,可直接配制成培養(yǎng)基使用;染色液為獨(dú)立包裝組分,請(qǐng)勿與培養(yǎng)基混用。
b. 配制培養(yǎng)基前,請(qǐng)瞬時(shí)離心各管小劑量試劑以免損失,配制后請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用完畢。
c. 培養(yǎng)基儲(chǔ)存條件:2~8℃,避光;配制后有效期:3 months。
d. 本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn),不可用于其他。
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒使用說明:
成骨誘導(dǎo)步驟
1. 接種誘導(dǎo)細(xì)胞:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,按照2×10^4cells/cm2的細(xì)胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中,于37℃,5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度60-70%,棄掉上清,加入成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。
2. 細(xì)胞分化誘導(dǎo):每2-3天更換成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基,于37℃,5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14-21天,并注意觀察細(xì)胞形態(tài)變化。根據(jù)細(xì)胞鈣鹽結(jié)晶析出和鈣質(zhì)結(jié)節(jié)形成的情況,決定終止細(xì)胞誘導(dǎo)的時(shí)間,進(jìn)行染色鑒定。
3. 細(xì)胞固定:吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次,棄去后取適量4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面,室溫固定30-60 min,棄去固定液再使用1×PBS清洗兩次。
4. 茜素紅染色:加入適量茜素紅染液染3~5min,吸去茜素紅染液,用1×PBS清洗兩次,并加入適量1×PBS避免細(xì)胞干燥。
5. 誘導(dǎo)評(píng)估:顯微鏡下觀察成骨染色效果,并進(jìn)行圖像采集和誘導(dǎo)評(píng)估。誘導(dǎo)成功時(shí),鈣質(zhì)結(jié)節(jié)會(huì)與茜素紅染料結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。
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