ProLite 橙色蛋白凝膠染料* 5000X *，可用于替代SYPRO Orange蛋白凝膠染料（SYPRO是ThermoFisher的商標(biāo)）。 ProLite 橙色蛋白凝膠染料* 5000X * 是一種靈敏的即用型熒光染料，可在一維凝膠中檢測總蛋白。該凝膠染料* 5000X 的靈敏度比傳統(tǒng)的銀染技術(shù)更好。 可以使用標(biāo)準(zhǔn)的UV或藍(lán)光透射儀或包含適當(dāng)濾鏡或激光的成像設(shè)備查看染色的蛋白質(zhì)。 熒光染色快速且高度靈敏，可檢測蛋白質(zhì)電泳凝膠和膜中的總蛋白質(zhì)。
樣品分析方案
儲存
存放在-20°C避光的地方。 按建議存放時，產(chǎn)品自收到之日起至少穩(wěn)定12個月。 可用醋酸或緩沖液稀釋的ProLite Orange可在4°C的玻璃或塑料瓶中保存三個月，避光。 打開之前，應(yīng)先將每個小瓶加熱至室溫，然后在微量離心機(jī)中短暫離心，以將DMSO溶液沉積在小瓶底部。 如果存在染料顆粒，請短暫超聲處理試管或劇烈渦旋試管。
工作溶液配制
ProLite Orange工作溶液（5000X）
用7.5％（v / v）乙酸稀釋5000X ProLite Orange儲備溶液，制成1X ProLite Orange儲備溶液，并劇烈混合。
注意：工作溶液多可以重復(fù)使用四次。 但是，我們觀察到第二次重用后響應(yīng)開始明顯減少。 強(qiáng)烈建議使用全新的工作溶液以獲得佳效果。
操作步驟
建議使用以下方案，并且可以將其用作準(zhǔn)則。但是，可能需要進(jìn)行一些比較才能確定哪一種可以更好地滿足您的需求。
電泳后染色蛋白
1.運(yùn)行凝膠。
2.將工作溶液倒入一個小的塑料皿中。
注意：對于一到兩個標(biāo)準(zhǔn)尺寸的小凝膠，請使用約50 mL的工作溶液。對于較大的凝膠，請使用500至700 mL的工作溶液。
注意：確保添加足夠的工作量以全部浸沒凝膠。
3.將凝膠放入工作溶液中。
注意：用鋁箔蓋住容器，以防止染料受光。
4.在室溫下輕輕攪拌凝膠10至60分鐘。
5.用7.5％的乙酸短暫沖洗。
6.可以在標(biāo)準(zhǔn)的300 nm紫外線透射儀或藍(lán)光透射儀上觀察凝膠。
7.脫色：大部分凝膠可通過在0.1％Tween®20中孵育過夜來脫色。或者，在7.5％乙酸的多種變化中孵育終將去除所有污漬。
