CytoFix 線粒體紅色探針是一種可獨(dú)立于線粒體膜電位梯度而選擇性地對(duì)線粒體進(jìn)行染色的染料。 由于此功能，即使固定后，該探針也可以很好地保留在線粒體中。 染料會(huì)滲透完整的活細(xì)胞，并被活細(xì)胞捕獲。 它的主要特征包括高染色效率，固定后可長(zhǎng)時(shí)間保留在細(xì)胞內(nèi)，并減少了人工操作時(shí)間。 該探針可與GFP表達(dá)的細(xì)胞一起使用，而不會(huì)重疊GFP的熒光，使其可用于多重分析。 它既可用于懸浮細(xì)胞，也可用于貼壁細(xì)胞，并易于適應(yīng)各種熒光平臺(tái)。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的CytoFix 線粒體紅色探針。
適用儀器
| 熒光顯微鏡 | |
| Ex: | Cy3/TRITC濾波片組 |
| Em： | Cy3/TRITC 濾波片組 |
| 推薦孔板: | 黑色透明底板 |
| 濾波片： | Cy3/TRITC 濾波片組 |
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡(jiǎn)要概述
在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中準(zhǔn)備細(xì)胞
用CytoFix MitoRed工作溶液在37°C孵育細(xì)胞20-30分鐘
去除CytoFix MitoRed工作溶液
用甲醛固定細(xì)胞（可選）
在熒光顯微鏡下用Cy3 / TRITC濾光片組進(jìn)行分析
溶液配制
工作溶液配制
將20 µL的儲(chǔ)備溶液加到10 mL的Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或自備緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)基中，并充分混合。
注意：20 µL儲(chǔ)備液足以進(jìn)行一次96孔板分析。 可以根據(jù)特定的細(xì)胞類(lèi)型和細(xì)胞或組織對(duì)探針的滲透性來(lái)改變?nèi)旧珬l件。
注意：未使用的CytoFix MitoRed儲(chǔ)備溶液可以分裝，并在≤-20°C下以較小的等分試樣存儲(chǔ)。 避光并避免重復(fù)的凍融循環(huán)。
實(shí)驗(yàn)步驟
1.在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞。
2.加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的CytoFix MitoRed工作溶液。
（注意細(xì)胞膜探針的濃度因具體應(yīng)用而異。）
3.避光保存，在37°C下孵育細(xì)胞20-30分鐘。
4.除去每個(gè)孔中的工作溶液。 用HHBS或自備緩沖液洗滌細(xì)胞。（可選的）
5.可選：在室溫下用4％多聚甲quan 溶液將細(xì)胞固定20-30分鐘。 洗滌兩次以除去固定液。
6.使用帶有Cy3 / TRITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光信號(hào)。
