肺栓塞動物模型動物的選擇
研究肺栓塞的病理生理學及影像學,實驗動物主要是狗、兔等;肺栓塞的治療研究,動物主要是大鼠、小鼠。
肺栓塞動物模型造模方法
一、家兔肺栓塞模型
家兔模型是目前較為成熟和普遍使用的,而且家兔的纖容系統(tǒng)比狗和豬更接近于人體的纖容系統(tǒng),所以家兔模型也是目前較為理想的肺栓塞模型。
1
體外血栓形成法
造模方法:造模前從耳緣靜脈抽血1 mL,注入無菌瓶內(nèi)靜置一段時間,使其凝血制成自體血凝塊,再經(jīng)股靜脈注入制好的血凝塊,輔以NS使血凝塊隨血液循環(huán)運行至肺動脈并將其堵塞,建立急性肺栓塞模型。
Tips:制作急性肺血栓栓塞模型的栓子很多,包括:血凝塊、明膠海綿、玻璃體球狀物、α2凝血mei、膠原蛋白等。一般實驗室常用血凝塊。由于自體血栓的形成和臨床肺栓塞癥血栓的形成具有一定的相似性,故能更真實地反映疾病的病理生理改變。
二、犬肺栓塞模型
1
自體血凝塊法
犬的急性肺栓塞模型多用體外自體血凝塊法。
造模方法:股動脈抽血80~100mL,注入到含凝血mei的玻璃器皿中,靜止使其凝固,制成大小約10mm×10mm×5mm的xue塊,經(jīng)右頸靜脈注入栓子,要維持肺動脈壓在50~60mmHg,一旦低于50mmHg,需再次注入栓子,此過程持續(xù)30 min,之后穩(wěn)定1h。
三、鼠肺栓塞模型
鼠模型的制備有的采用血凝塊,有的用藥物誘導,自體血凝塊的制作與犬模型中的血凝塊的制作方法相似。
栓子制作:無菌條件下從頸動脈插管取血0.5ml,迅速推入細聚乙烯導管,室溫靜置25~30 min凝固,推入生理鹽水,制成直徑約0.6~0.8 mm自體血栓。無菌手術(shù)dao切成長3~4 mm,滅菌生理鹽水反復沖洗,計數(shù)約50個備用。
造模方法:腹腔注射20%烏拉坦6 ml/kg麻醉,必要時追加0.5 ml/h。沿頸前正中線做長約2cm 切口,鈍性分離右頸外靜脈和左頸動脈,插管分別接YP100型壓力傳感器,量程分別為(-10~10 kPa)和(-10~40 kPa),動態(tài)監(jiān)測肺動脈壓和體動脈壓的變化。右頸外靜脈經(jīng)導管快速、反復注入已制備血栓20~30個,注栓速度0.5 ml/s,使肺動脈收縮壓(sPAP)維持在40~60 mmHg之間約60 min,生理鹽水沖洗以防栓子滯留于導管或頸靜脈內(nèi)??p合切口,電腦記錄肺動脈壓和體動脈壓動態(tài)變化。
造模結(jié)果:大鼠自體血栓肺栓塞模型制備的成功率約85%。注入自體血栓20~30 min后,大鼠肺動脈壓明顯升高。早期肺動脈壓升高后很快回落,后隨血栓的注入逐漸持續(xù)升高,能維持2~4 h。同時大鼠呼吸加快加深,口唇發(fā)紺,兩肺出現(xiàn)彌漫性干濕啰音等肺栓塞體征。肺灌注掃描ECT顯像,見兩肺明顯放射性缺損和稀疏。大體組織見肺膨脹不全,胸膜下和切面上見較多的散在出血灶。肺組織光鏡觀察見肺動脈內(nèi)有注入的血栓團塊,以淡藍色纖維素包繞大量紅細胞,可區(qū)別于肺淤血。同時見肺血管壁肌層組織水腫,大量炎癥細胞浸潤。
優(yōu)點:采用改良右心導管法,動態(tài)監(jiān)測肺動脈壓變化。其較通常的股靜脈注栓法具有路徑短、栓子穩(wěn)定、可控性強等優(yōu)點。