糖尿病視網(wǎng)膜病變模型來源
鏈脲佐菌素(STZ)導(dǎo)致糖尿病,并誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變
模式動(dòng)物品系:SPF 級(jí)SD大鼠,雄性,8 周
實(shí)驗(yàn)分組:正常對(duì)照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個(gè)劑量組
實(shí)驗(yàn)周期:8~10 weeks
糖尿病視網(wǎng)膜病變模型建模方法
適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后進(jìn)行建模。糖尿病組建模前禁食16h,稱重空腹體重,尾靜脈取血測(cè)定血糖濃度,一次性腹腔注射鏈脲佐菌素STZ(65mg/kg),72h、96h、120h后應(yīng)用穩(wěn)步血糖測(cè)定儀檢測(cè)隨機(jī)血糖,測(cè)定體重,觀察一般情況如體型及毛發(fā)顏色變化。每組取尾靜脈血測(cè)量血糖,連續(xù)3次血糖≥16.7mmol/L,并出現(xiàn)典型的“三多一少"癥狀者,即可確定為糖尿病小鼠。
健康對(duì)照組將STZ改為等體積生理鹽水,其它步驟相同。
取材:造模后6周處死,取左眼及右眼視網(wǎng)膜。
制備視網(wǎng)膜消化鋪片:大鼠麻醉后斷頭處死,取眼球,4%多聚甲醛固定24~48h,自睫狀體后部近鋸齒緣剪開鞏膜,去掉眼晶狀體和玻璃體,將眼后段平均分成3份, 在水中輕輕漂取視網(wǎng)膜;清水漂洗2~3h。將視網(wǎng)膜放人用3%胰蛋白mei消化溶液中,在37°C恒溫箱中孵育2~3h,將視網(wǎng)膜輕輕移人蒸餾水中,輕輕吹打,使殘余的視網(wǎng)膜神經(jīng)成分及內(nèi)界膜全脫去,剩下一層透明的視網(wǎng)膜血管網(wǎng),移到載坡片上盡量鋪平,自然干燥。