大鼠動物髓核細胞的原代培養(yǎng)方法
剃去背毛,75%酒精浸泡5min。
盡量剔除附著的肌肉,用含2%雙抗的PBS沖洗3-5次。
消化結束 ,20%FBS終止消化,100um濾網過濾,1000r/min 離心 5min,棄上清后DMEM/F12 重懸,按 1×105/ml接種于培養(yǎng)板,加入含1%雙抗和 15% FBS 的 DMEM/F12,置于37 ℃細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4 d后換液,以后每3天換 液 1 次,細胞達 90% 融合后傳代。
大鼠動物髓核細胞的原代培養(yǎng)評價
原代細胞(primary cell):是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞,稱為原代細胞。