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肺纖維化動物模型構(gòu)建

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  • 公司名稱伊萊博生物科技(上海)有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)其他
  • 更新時間2024/9/18 14:44:47
  • 訪問次數(shù)298
產(chǎn)品標(biāo)簽:

肺纖維化動物模型構(gòu)建

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伊萊博生物科技(上海)有限公司(簡稱,伊萊博生物),總部位于上海市長江軟件園,2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,是一家以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)的創(chuàng)新型高科技企業(yè)。主要致力于為科研人員及機(jī)構(gòu)提供專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊和實驗平臺,建立包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)和動物實驗等學(xué)科的研究服務(wù)體系。

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團(tuán)隊主要來自中國科學(xué)院大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點高校及科研機(jī)構(gòu),能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。


為了響應(yīng)大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號召,推動生命科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢,提供培訓(xùn)服務(wù)。通過實驗理論培訓(xùn)和實踐相結(jié)合,充分了解科學(xué)研究和實驗操作的全過程,培訓(xùn)規(guī)范的實驗操作、分析問題和解決問題的能力,分層次培養(yǎng)科研人才,為其今后的科研工作奠定堅實的基礎(chǔ)。


因為專業(yè),所以值得信賴;因為專注,所以高速發(fā)展;堅持“誠信創(chuàng)新,互利共贏”的原則;朝著“解決科研問題”這一目標(biāo),伊萊博人將通過自身的努力,與一線科研人員共同推動生命科學(xué)的快速發(fā)展!



實驗技術(shù)服務(wù)
肺纖維化動物模型構(gòu)建是伊萊博生物較為成熟的動物模型之一,由動物平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
肺纖維化動物模型構(gòu)建 產(chǎn)品信息

一、肺纖維化背景簡介

肺纖維化(pulmonary fibrosis,PF)是肺組織異常修復(fù)造成不可逆損傷的一類疾病,以炎癥和細(xì)胞外基質(zhì)沉積為特征,呈進(jìn)展性和致死性的彌漫性肺間質(zhì)疾病,其中,特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)發(fā)病率最高。

二、肺纖維化動物模型構(gòu)建簡介

構(gòu)建一個理想的肺纖維化模型,不僅有助于進(jìn)一步篩選肺纖維化生物標(biāo)志物,同時也為深入研究肺纖維化發(fā)病機(jī)制及動物臨床治療肺纖維化和研發(fā)新藥提供科學(xué)基礎(chǔ)。

三、肺纖維化動物模型構(gòu)建方法

1. 實驗動物

C57小鼠   6周齡

2. 實驗材料

blms,注射器

3. blms誘導(dǎo)模型制備流程

1)小鼠按照麻醉劑劑量麻醉后固定,呈仰臥位姿勢,氣管居中,暴露頸部,剪毛備皮,無水乙醇消毒后沿頸部中線開口(開口大小:0.5-1cm左右)緩慢鈍性分離至氣管,此時需要輕柔操作,減少因手術(shù)操作造成的氣管損傷。

(2)使用注射器(1ml或者微量注射器,胰島素針不失為好的選擇),針頭幾乎平行于氣管平面,經(jīng)氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端插入氣管內(nèi),回抽無阻力,則注入少量的blms溶液(不超過0.2 ml/只,肺內(nèi)大量積液會導(dǎo)致動物的死亡)。

(3)注射完畢后,縫合傷口,后將動物直立1-3 min,適度左右轉(zhuǎn)動,并輕輕按摩小鼠胸部,保證blms在肺內(nèi)均勻分布,動物清醒后常規(guī)飼養(yǎng)。(3天左右即可出現(xiàn)損傷,體重降低等癥狀)28d后收集樣本。

特發(fā)性:

1. 選用SD大鼠或C57小鼠,通過blms(5mg/kg)或者脂多糖(5mg/kg)氣管內(nèi)給藥,建立特發(fā)性肺纖維化模型。

2. 麻醉動物,仰臥固定于實驗臺上。

3. 頸部去毛后碘伏消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管。

4. 將微量注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力后,注入LPS溶液或者BLM溶液。

5. 手術(shù)完畢后迅速將動物直立、旋轉(zhuǎn),使藥液在肺內(nèi)分布均勻。

6. 動物清醒后常規(guī)飼養(yǎng),注意術(shù)后護(hù)理,成模周期一般在6個月左右



4.模型鑒定

4.1 HE染色觀察肺組織肺泡炎程度

 肺組織肺泡炎評分:無肺泡炎計1 分,輕、中、重度肺泡炎分別計2、3、4 分。輕度肺泡炎主要表現(xiàn)為單核細(xì)胞浸潤,肺泡間隔增寬但結(jié)構(gòu)正常,浸潤局限于近胸膜部,受累面積小于全肺的20 %;中度肺泡炎受累面積占全肺20 % ~ 50 %;重度肺泡炎受累面積占全肺的50 % 以上,偶見肺泡腔內(nèi)有單核細(xì)胞及出血造成實變。

4.2 Masson染色觀察肺組織肺纖維化程度

 肺纖維化程度評分:無纖維化計1 分,輕、中、重度肺纖維分別計2、3、4 分。輕度纖維化主要累及胸膜及胸膜下肺間質(zhì),肺泡結(jié)構(gòu)紊亂,受累面積小于20 %;中度纖維化受累面積占全肺的20 %~50 %;重度纖維化受累面積占全肺的50 % 以上,肺實質(zhì)紊亂,并有融合,可見大小不等的囊氣腔。

四、小結(jié)

在PE動物模型中,BLM造模可行性好,研究性強(qiáng),能夠重視一般PE,其用于IPE發(fā)病機(jī)制的研究和有效治療藥物的研發(fā)具有很大的實用價值。但是BPF動物模型與臨床IPE相比仍存有一定差異,在實驗研究應(yīng)用方面也有一定局限性,因此需加強(qiáng)對BLM作用機(jī)制及IPE的研究,進(jìn)一步明確其相關(guān)性。

五、參考文獻(xiàn)

[1] 張成華,朱慶均,田景振,(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,濟(jì)南 250355;2.山東中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院,濟(jì)南 250355;3.山東省高校中醫(yī)藥抗病毒協(xié)同創(chuàng)新中心,濟(jì)南 250355)

[2]Villarreal AM,Yu H,Printz MP.Bradykinin—induced re— duction in collagen gene expression involve prostacyclin[J]. Hypertension,1998,32(1):81—84.

[3]蔡后榮 .2011年特發(fā)性肺纖維化診斷和治療循證新指 南解讀 .中國呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志,2011,10(4):

[4] Lutz W ,Eva W,Alexander P,et a1.Mode ofaction of nintedanib in the treatment of idiopathic pulmonary fibro— sis[J].EurRespir J.2015,45(5):1434—1445.

[5]Hinz B,Phan SH,Thannickal VJ,et a1.Recent develop— ments in myof

ibroblast biology:paradigms for connec— tive tissue remodeling[J].Am J Pathol,2012,180(4): 1340—1355


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