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分子克隆與質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

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  • 公司名稱伊萊博生物科技(上海)有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)其他
  • 更新時間2024/8/6 10:23:07
  • 訪問次數(shù)448
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分子克隆與質(zhì)粒載體構(gòu)建

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伊萊博生物科技(上海)有限公司(簡稱,伊萊博生物),總部位于上海市長江軟件園,2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,是一家以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)的創(chuàng)新型高科技企業(yè)。主要致力于為科研人員及機(jī)構(gòu)提供專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊和實驗平臺,建立包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)和動物實驗等學(xué)科的研究服務(wù)體系。

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團(tuán)隊主要來自中國科學(xué)院大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。


為了響應(yīng)大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號召,推動生命科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢,提供培訓(xùn)服務(wù)。通過實驗理論培訓(xùn)和實踐相結(jié)合,充分了解科學(xué)研究和實驗操作的全過程,培訓(xùn)規(guī)范的實驗操作、分析問題和解決問題的能力,分層次培養(yǎng)科研人才,為其今后的科研工作奠定堅實的基礎(chǔ)。


因為專業(yè),所以值得信賴;因為專注,所以高速發(fā)展;堅持“誠信創(chuàng)新,互利共贏”的原則;朝著“解決科研問題”這一目標(biāo),伊萊博人將通過自身的努力,與一線科研人員共同推動生命科學(xué)的快速發(fā)展!



實驗技術(shù)服務(wù)
分子克隆與質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)是分子生物學(xué)研究中的一項重要服務(wù),它涉及在分子水平上純化和擴(kuò)增特定DNA片段,并將其插入到質(zhì)粒等載體中,以便在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和擴(kuò)增。
分子克隆與質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù) 產(chǎn)品信息

分子克隆與質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)


一、分子克隆與質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)實驗原理


外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組,這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統(tǒng)中,將分別經(jīng)酶切的載體分子與外源DNA分子進(jìn)行連接。DNA連接酶有兩種:T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有將兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能,而且T4噬菌體DNA連接酶還有—種大腸桿菌連接酶沒有的特性,即能使兩個平末端的雙鏈DNA分子連接起來。但這種連接的效率比粘性末端的連接效率低,一般可通過提高T4噬菌體DNA連接酶濃度或增加DNA濃度來提高平末端的連接效率。

T4噬菌體DNA連接酶催化DNA連接反應(yīng)分為3步:T4DNA連接酶與輔助因子ATP形成酶—AMP復(fù)合物;然后,酶—AMP復(fù)合物再結(jié)合到具有5’磷酸基和3’羥基切口的DNA上,使DNA腺苷化;后產(chǎn)生一個新的磷酸二酯鍵,把切口封起來。

DNA重組的方法主要有粘端連接法和平端連接法,為了防止載體本身的自連,可以通過(牛小腸堿性磷酸酶)CIP處理克服。

連接反應(yīng)的溫度在37℃時有利于連接酶的活性.但是在這個溫度下,粘性末端的氫鍵結(jié)合是不穩(wěn)定的。因此人們找到了一個折中溫度,即12-16℃,連接12-16h(過夜),這樣既可大限度地發(fā)揮連接酶的活性,又兼顧到短暫配對結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。


二、實驗流程

目的DNA的擴(kuò)增和純化;連接反應(yīng);電泳檢測連接產(chǎn)物。


三、客戶提供

樣本DNA,基因序列,試劑盒。


四、公司提供

構(gòu)建好的載體,電泳膠圖,測序結(jié)果。

實驗周期:大約1-2月。




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