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NEB10-beta電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

參考價(jià)	￥ 4800
訂貨量	≥1盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

公司名稱(chēng)南京沃博生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號(hào)ZC1044D
所在地南京市
廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)廠(chǎng)家
更新時(shí)間2024/8/5 10:24:49
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù)138

產(chǎn)品標(biāo)簽:

菌株內(nèi)切酶

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公司介紹主營(yíng)產(chǎn)品

自主生化試劑品牌warbio已經(jīng)入駐多家高校平臺(tái)，先后入駐南京大學(xué)，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，東南大學(xué)，西湖大學(xué)，華南理工大學(xué)，北京師范大學(xué)，福建農(nóng)林大學(xué)，北京庫(kù)巴扎，天津基理，上海至采信息采購(gòu)平臺(tái)等公司秉持誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，為科研工作者提供更好的產(chǎn)品。專(zhuān)業(yè)代理銷(xiāo)售國(guó)內(nèi)外生命科學(xué)領(lǐng)域的產(chǎn)品以及warbio沃博生物常規(guī)生化試劑，公司長(zhǎng)期以來(lái)與眾多國(guó)內(nèi)外廠(chǎng)家和多家專(zhuān)業(yè)代理銷(xiāo)售公司保持密切聯(lián)系、溝通與合作，擁有穩(wěn)定、有效的產(chǎn)品供應(yīng)渠道。公司長(zhǎng)期以來(lái)以提供高質(zhì)量的產(chǎn)品、實(shí)惠的價(jià)格和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)贏得客戶(hù)的好評(píng)，與多家高等院校、研究所、醫(yī)院、制藥企業(yè)等大型科研機(jī)構(gòu)建立長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系。
主要代理北京莊盟生物分子試劑，Abmart艾比瑪特抗體，美國(guó)Phytoteche一級(jí)代理，美國(guó)AATBIO細(xì)胞染料，安普未來(lái)恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒，英國(guó)TwistDx公司RPA等溫?cái)U(kuò)增試劑盒，美國(guó)GLPBIO抑制劑，Tolobio吐露港生物，藥物發(fā)現(xiàn)一站式平臺(tái) 陶術(shù)生物Topscience等國(guó)外生命科學(xué)產(chǎn)品試劑耗材。

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生物科生物科技技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)；實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品、機(jī)電設(shè)備、藥品、化妝品、包裝材料、實(shí)驗(yàn)室耗材技技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)；實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品、機(jī)電設(shè)備、藥品、化妝品、包裝材料、實(shí)驗(yàn)室耗材

產(chǎn)品簡(jiǎn)介在線(xiàn)詢(xún)價(jià)

CAS	ZC1044D	產(chǎn)品規(guī)格	50μl×20支
級(jí)別	超純、高純

大腸桿菌K12菌株背景，DH10B菌株的衍生菌株，核基因中具有l(wèi)ianmeisu抗性基因(StrR)；可轉(zhuǎn)化大質(zhì)粒和BACs；DNA重組缺陷(recA1)和內(nèi)切酶 I缺陷(endA1)的特點(diǎn)有利于DNA克隆的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提?。粚?duì)T1噬菌體有抵抗能力（fhuA2）；無(wú)需添加IPTG，只加X(jué)-gal即可檢測(cè)beta半乳糖苷酶活性，用于藍(lán)白斑篩選。

NEB10-beta電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品信息

大腸桿菌K12菌株背景，DH10B菌株的衍生菌株，核基因中具有l(wèi)ianmeisu抗性基因(StrR)；可轉(zhuǎn)化大質(zhì)粒和BACs；DNA重組缺陷(recA1)和內(nèi)切酶 I缺陷(endA1)的特點(diǎn)有利于DNA克隆的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提??；對(duì)T1噬菌體有抵抗能力（fhuA2）；無(wú)需添加IPTG，只加X(jué)-gal即可檢測(cè)beta半乳糖苷酶活性，用于藍(lán)白斑篩選。

NEB 10-beta電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞只能用于電擊轉(zhuǎn)化，不能用于熱激轉(zhuǎn)化。該菌株為DH10B衍生株，屬大腸桿菌K12菌株，特別適用于BAC，Cosmid等大質(zhì)粒骨架的文庫(kù)構(gòu)建和大質(zhì)?？寺』驍U(kuò)增。DNA重組缺陷(recA1)和I型內(nèi)切酶缺陷(endA1)的特點(diǎn)有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA的提取。該菌株具有抗T1噬菌體感染的特點(diǎn)，還可用于藍(lán)/白斑篩選實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)β-半乳糖苷酶的活性時(shí)，無(wú)需添加IPTG，只加X(jué)-gal即可。NEB 10-beta電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1X10cfu/μg DNA?；蛐蜑?araD139△(ara,leu)7697 fhuA lacX74 galK16 galE15 mcrA80d(lacZM15)recAl relAl endAlnupG rpsL rph spoT1△(mrrhsdRMS-mcrBC)

操作方法:

1.電極間距為 0.1cm 的電轉(zhuǎn)杯(Gene Pulser/MicroPulser" electroporation cuvettes)插入碎冰中，壓實(shí)冰面,冰中靜置5分鐘,使電轉(zhuǎn)杯充分降溫。(電轉(zhuǎn)杯重復(fù)使用方法:每次用完后,用大量的自來(lái)水沖洗干凈去掉菌液和DNA,用蒸餾水洗3遍,將其泡在75%乙醇中30分鐘,取出杯子,瀝干液體,放在超凈臺(tái)中,使乙醇充分揮發(fā),蓋上蓋子放干燥地方備用)。2.取-70℃保存的感受態(tài)細(xì)胞插入冰中,待細(xì)胞剛化凍后,加入質(zhì)粒DNA或連接產(chǎn)物(洗脫或溶解質(zhì)粒的溶液中離子不能太高,或用雙蒸水稀釋,對(duì)照pUC19可以用無(wú)菌水稀釋到10pg/μl),用手指boda管底輕輕混勻,立即插入冰中,在超凈臺(tái)中用無(wú)菌吸頭將細(xì)胞/DNA混合物快速轉(zhuǎn)移到電擊杯中,避免產(chǎn)生氣泡,確保細(xì)胞沉到杯底,蓋上杯蓋,空管保留待用。3.啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置電擊參數(shù):2.4kV,200Ω,25μF(BTX ECM 630或Bio-Rad GenePulser)。用紙巾擦掉電轉(zhuǎn)杯外部的水分,將電轉(zhuǎn)杯放入電轉(zhuǎn)槽中進(jìn)行電擊。完成后,將電轉(zhuǎn)杯插入冰中,加入950μl無(wú)抗生素的 SOC 或LB培養(yǎng)基,并將液體轉(zhuǎn)移到原來(lái)保留的感受態(tài)空管中,37C,150-250rpm 振蕩培養(yǎng)1小時(shí)。4.取 100-200μl左右的菌液或稀釋后的菌液,涂布于含相應(yīng)抗生素的LB平板上,倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)12-18小時(shí)。

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱