穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選外包技術(shù)服務(wù)
穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選外包技術(shù)服務(wù)目的:
穩(wěn)轉(zhuǎn)株長用于基因研究方向,便于長期觀察和檢驗基因?qū)τ诩毎δ芤约暗鞍椎南嗷プ饔谩?/span>
一般轉(zhuǎn)染實驗方法:
用轉(zhuǎn)染質(zhì)粒或病毒侵染的方法將構(gòu)建好的含靶基因的載體導(dǎo)入細胞,根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應(yīng)的試劑進行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎(chǔ)上,得到單細胞長出的陽性單克隆,繼而得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株。
一般篩選方法:
1、轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩(wěn)定細胞系
對大多數(shù)細胞轉(zhuǎn)染效率較低。對于基因過表達,如果轉(zhuǎn)染效率達到40%,基因過表達尚可。但是對于基因干擾實驗,對轉(zhuǎn)染效率要求遠遠高于基因過表達,通常質(zhì)粒轉(zhuǎn)染無法滿足。
另外,質(zhì)粒游離于細胞質(zhì)中,很快降解,無法滿足較長時間的檢測項目;質(zhì)粒轉(zhuǎn)染整合幾率極低,穩(wěn)定細胞株構(gòu)建耗時耗力,且得率很低,往往需要挑取單克隆株。
2、病毒感染篩選穩(wěn)定細胞株
病毒感染方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩(wěn)定細胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株,由于其高效整合、高效轉(zhuǎn)錄、高效表達、宿主范圍廣,感染效率高,且與細胞染色體整合而不發(fā)生基因重排,是制備穩(wěn)定細胞株的理想載體。
服務(wù)內(nèi)容:1、穩(wěn)定:15代以內(nèi)細胞穩(wěn)定表達。
2、迅速:一般控制在1個月以內(nèi)完成構(gòu)建。
3、經(jīng)濟:價格實惠。
4、質(zhì)量:對外源基因進行嚴格鑒定。
伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團隊主要來自大學、復(fù)旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構(gòu),能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。