BHK-21 [C-13] (倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞)
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
種屬 | 倉(cāng)鼠 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 編號(hào) | GOY-01X0034 |
商品詳情:
別稱 BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; Baby Hamster Kidney from litter No. 21; BHK
種屬 敘利亞種金地鼠
年齡(性別) 1日齡
組織來(lái)源 正常腎
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
背景描述:BHK-21 [C-13]的親本細(xì)胞株是由I·A·Macpherson和M·G·P·Stoker于1961年3月從1日齡的倉(cāng)鼠建立的。隨后84天連續(xù)培養(yǎng),僅中斷8天進(jìn)行凍存,通過單細(xì)胞分離建立了13號(hào)克隆,即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]細(xì)胞可用作轉(zhuǎn)染宿主,用于表達(dá)包含選擇及擴(kuò)增標(biāo)記的DNA的載體。
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~12小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠乳過氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: LPO ELISA Kit
Mouse angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒
RatInhibin,INH-AELISAKit 大鼠抑制素A(INH-A)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGzms-BELISAKit大鼠顆粒酶B
細(xì)胞型肝病毒蛋白酶(HCVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20次
Raturokinase,UKELISAKit大鼠(UK)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
CD5L重組小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原
RELA重組人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 標(biāo)簽) Protein
HIST3H2A Protein Human 重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白
VCAM1 Protein Mouse 重組小鼠 VCAM1 / CD106 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原
HIST3H2A Protein Human 重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白
CD5L重組小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein
VCAM1 Protein Mouse 重組小鼠 VCAM1 / CD106 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
RELA重組人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 標(biāo)簽) Protein
BHK-21 [C-13] (倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞)小鼠N端前腦素(-proBNP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat homocysteic acid (Hcy) ELISA Kit 大鼠同型半胱(Hcy)檢測(cè)試劑盒
HumanEsadiol,E2ELISAKit 人雌二醇(E2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humancolicin檢測(cè)試劑盒人大腸菌素(colicin)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)合成酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumaegeneratinggeneⅣ,REG-4ELISAKit人再生基因蛋白IV(REG-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔型纖溶酶原激活物(uPA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細(xì)胞僅供科研使用。
八、備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。