DNBS誘導(dǎo)結(jié)腸炎大鼠模型
一、結(jié)腸炎背景介紹
結(jié)腸炎患者常表現(xiàn)出不同程度的腹痛、持續(xù)性腹瀉、黏液便及膿血便、里急后重等癥狀。此外,還可能伴有消瘦、乏力、腸鳴、失眠、多夢等全身癥狀。病情嚴(yán)重時(shí),可出現(xiàn)中毒性巨結(jié)腸、結(jié)腸狹窄和梗阻、大出血等并發(fā)癥。
二、DNBS誘導(dǎo)結(jié)腸炎大鼠模型
DNBS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型是通過向動(dòng)物(如小鼠或大鼠)的直腸內(nèi)滴注粘膜致敏劑DNBS(在不同濃度的乙醇中稀釋),從而打破腸道屏障,使DNBS與結(jié)腸組織蛋白相互作用,觸發(fā)宿主的先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng),進(jìn)而誘導(dǎo)結(jié)腸炎的發(fā)生。
三、模型構(gòu)建
3.1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、耗材
大、小鼠
3.2、造模方法
1. 新鮮制備15-30 mg DNBS/250μl 50%乙醇。
2. 將1毫升注射器連接到19G針頭上,針頭末端固定有聚乙烯導(dǎo)管。
3. 輕輕麻醉在加熱墊上的大鼠(1.5%異氟醚,動(dòng)物仍保持清醒、眨眼和吞咽反射,并顯示有規(guī)律的呼吸)。
4. 用指尖輕輕按壓動(dòng)物的后端,清除遠(yuǎn)端結(jié)腸中可能存在的任何糞便。
5. 輕輕地將導(dǎo)管插入直腸內(nèi),到達(dá)肛men近端約8 cm。插入導(dǎo)管時(shí)加入少量溶液進(jìn)行潤滑,以便于插入。
6. 緩慢注射250μl DNBS,或等量50%乙醇作為對照。注入DNBS后,動(dòng)物頭朝下90秒。
7. DNBS給藥后,在第一周給動(dòng)物喂食8%蔗糖水和0.2%鹽水,以防止脫水。
8. 仔細(xì)觀察動(dòng)物,在實(shí)驗(yàn)期間每天監(jiān)測體重、脫水、痛苦等的跡象。
四、模型驗(yàn)證
結(jié)腸損傷的病理評分。
五、小結(jié)
DNBS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型具有典型癥狀、發(fā)病迅速、成本較低等特點(diǎn),在藥物評估和機(jī)制研究方面具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
六、參考文獻(xiàn)
[1]. 李曦等, 依tuo咪酯對DNBS誘導(dǎo)的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎氧化應(yīng)激和炎癥因子表達(dá)的干預(yù)及機(jī)制研究. 中國免疫學(xué)雜志, 2021. 37(23): 第2822-2826+2831頁.
[2]. 朱代華, 張興明與郭丹, 二硝基苯磺酸誘導(dǎo)的鼠潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2004. 29(4): 第486-487+490頁.