產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Human BMP-15 Protein, His tag
產(chǎn)品中文名稱：重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15，His-標(biāo)簽BMP-15
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號(hào)：EY-01X8701
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):
表達(dá)宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來(lái)源于：人BMP15 (Gln268-Arg392) (O95972) 表達(dá)的蛋白片段。
活性:Testing in progress.
蛋白長(zhǎng)度：重組人GDF7由129個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為14.2 KD。
純度:> 98% ，使用SDS-PAGE檢測(cè)
通過(guò)LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。
產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的20 mM Tris，50 mM NaCl，pH 8.0。
基因ID:9210
使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使用前，請(qǐng)動(dòng)?動(dòng)
背景
Bone morphogenetic protein 15 (BMP-15), also known as GDF-9B, is a TGF-β superfamily ligand that is expressed by oocytes throughout folliculogenesis, and plays an important role in oocyte development. BMP-15 promotes the FSH-independent proliferation of ovarian granulosa cells (GC) and induces GC glycolysis and cholesterol synthesis. It also induces GC production of stem cell factor which, in turn, negatively regulates BMP-15 expression in oocytes. BMP-15 blocks the FS-induced GC expression of FSH R and multiple steroidogenic molecules.
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2 0.5mgCAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原
HRAS Protein Human 重組人 HRAS / GTPase Hras 蛋白
ACP5重組小鼠 ACP5 / TRAP 蛋白 Protein
PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein
小鼠D-乳酸(D-LAC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T
Rat vitamin C (VC) ELISA Kit 大鼠C(VC)檢測(cè)試劑盒
HumanDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit 人脫輕表雄酮S7(DHEA-S7)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanColonCancerAigen,CCA檢測(cè)試劑盒人結(jié)腸癌抗原(CCA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織AMPK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanpyruvatekinase,PKELISAKit人同酸激酶(PK)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔核因子κB受體活化因子配基（RANKL）檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠雌激素受體(ER)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ER ELISA Kit
Mouse aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLH促黃體生成素
通用型HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitBNP腦素/腦尿肽
重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15，His-標(biāo)簽BMP-15ACP5重組小鼠 ACP5 / TRAP 蛋白 Protein
CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2 0.5mgCAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原
TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein
HRAS Protein Human 重組人 HRAS / GTPase Hras 蛋白
PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
