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小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒供應(yīng)商

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  • 公司名稱杭州迪測生物科技有限公司
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  • 所  在  地杭州市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間2016/9/6 0:57:08
  • 訪問次數(shù)788
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杭州迪測生物科技有限公司是一家專業(yè)經(jīng)營elisa試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,小鼠elisa試劑盒專賣的公司。
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小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒,根據(jù)客戶的不同需要提供經(jīng)濟(jì)、快速而可靠的產(chǎn)品,以滿足您的研發(fā)或生產(chǎn)需要!請您放心選購,咨詢!
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒供應(yīng)商 產(chǎn)品信息

 產(chǎn)品名稱:小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒供應(yīng)商 
英文名稱:Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA 試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):B-21996


實(shí)驗(yàn)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

檢測原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理

(一) 原理

  ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。    

(二) 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒供應(yīng)商 
操作步驟

     方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。

  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。

  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。

  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。也可測O•D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔O•D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:   

  用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

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