豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
產(chǎn)品英文名稱:Guinea Pig advanced glycation end products,AGEs ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)方法:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)
標(biāo)本:血清,血漿,細(xì)胞上清液,組織等
種屬:Porcine/豬
試劑盒說(shuō)明書(shū):請(qǐng)來(lái)電或者郵件索取
價(jià)格:詢價(jià)( : :劉)
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞 3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到10^4-10^6/ml左右,通過(guò)反復(fù)凍融,
使細(xì)胞破壞,并放出細(xì)胞內(nèi)成份?;蛘呒?xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清: 在室溫 下, 血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置 10 -20 分鐘后,
以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集 ,以 1000×g
離心、15 分鐘 ,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取 組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,超聲破碎儀,
將標(biāo)本勻漿,以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ,收集上清進(jìn)行檢測(cè) 。
7. 樣品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的( HRP)活性。
8. 保存 :如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-80 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)
沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度加熱解或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟 :
1. 取出 試劑盒,室溫( 20 -25 ℃)放置 30 分鐘。
2. 分組: 取出 96 孔板 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù) 量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需板條,把剩余的板條繼續(xù)
冷藏處理,分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個(gè)濃度)、空白 孔、待測(cè)樣品組。
注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入100ul的
蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul 的酶標(biāo)溶液 (空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15 -30s 30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑A液 50ul 后,再加入顯色劑 B液 50ul.
8. 終止:25 -37 ℃下避光反應(yīng)10 -15分鐘,加入 50 ul 終止液。
9. 讀板:在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的O 值.注: 讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,
讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的30 分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司對(duì)外承攬?jiān)囼?yàn):免疫組化,Tunel,WB,原位雜交,比色法,HE染色,特染,圖像分析,ELISA酶聯(lián)免疫代測(cè)等
北京雅安達(dá)生物年中回饋,所有產(chǎn)品一律7折出售,另還有好禮相送,咨詢!本公司提供的elisa試劑盒均*質(zhì)量保證,全程提供技術(shù)服務(wù),提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),有質(zhì)量問(wèn)題,免費(fèi)包退換!