小鼠成纖維生長因子FGF 酶聯(lián)免疫/酶免法ELISA 試劑盒
小鼠成纖維生長因子FGF 酶聯(lián)免疫/酶免法ELISA 試劑盒
ELISA應(yīng)用的一些說明:克服非特異性吸附
在ELISA中,非特異性吸附是值得注意的問題,如果抗原或抗體純化不過關(guān),產(chǎn)生非特異性吸附是實驗操作中無法避免的。
但是,即使抗原抗體的純化達(dá)到一定水平,還是有可能產(chǎn)生非特異性吸附。例如塑料載體表面的吸附,為了避免非特異性顯色,需用含Tween20的PBS或生理鹽水作為洗脫液,吐溫 (Tween)就是指聚氧乙烯去水*脂肪酸酯,為非離子型的表面張力物質(zhì),常作為助溶劑。根據(jù)它與聚合*所結(jié)合的脂肪酸種類不同而進(jìn)行吐溫編號,結(jié)合月桂酸的為吐溫20,結(jié)合棕櫚酸的為溫40,結(jié)合硬脂酸的為吐溫60,結(jié)合油酸的為吐溫80。在免疫酶技術(shù)中常用含吐溫20的PBS作洗滌劑或作稀釋樣品和酶標(biāo)抗體(抗原)之用,它的洗滌效果要比牛血清蛋白溶液(0.5%)好,具有減少非特異性吸附和增強(qiáng)抗原抗體結(jié)合的作用。吐溫20的使用量一般在0.06%-0.1%.有學(xué)者認(rèn)為,Tween20還有增強(qiáng)特異性反應(yīng)的作用。另外,檢測血清和酶標(biāo)記抗體用含0.5%-1%牛血清白蛋白(或0.1%白明膠)稀釋也能得到增強(qiáng)特異性吸附的作用。樣品首先用稀釋的健血清孵育,也有助于去除非特異性顯色。除此之外,反應(yīng)的時間和掌握反應(yīng)劑zui適濃度,也有助于克服非特異性吸附。
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產(chǎn)品特點:
準(zhǔn)確度高,靈敏度高,特異性強(qiáng)
檢測時間短
操作簡便
安全可靠
樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-80度可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加*。
基因工程試劑對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響:
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各總化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
試劑特點(檢測模式:臨 床抗體夾心法):
包被抗體為山羊多抗,多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。
酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位。
可測得HBsAg變異樣品。
提高檢測的特異性(99.98%)
提高檢測的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈 敏度為0.05ng/ml對ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
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