細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些：
1.顯微技術(shù)：包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù)：離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程：細(xì)胞培養(yǎng)。
Alexa Fluor 488/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面，這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰(PS)從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外，使PS暴露在細(xì)胞膜外表面。PS是一種帶負(fù)電荷的磷脂，正常主要存在于細(xì)胞膜的內(nèi)面，在細(xì)胞發(fā)生凋亡時細(xì)胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細(xì)胞膜外。Annexin V具有易于結(jié)合到磷脂類如PS的特性，對PS有高度的親和性。因此，該蛋白可充當(dāng)一敏感的探針檢測暴露在細(xì)胞膜表面的PS。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細(xì)胞非透過性熒光染料碘化丙啶不能通過完整的活細(xì)胞，但能夠?qū)乃篮偷蛲鐾砥诘募?xì)胞進(jìn)行染色， 因此通常將Annexin V與PI配合染色， 以區(qū)別凋亡早期細(xì)胞與壞死細(xì)胞和凋亡的晚期細(xì)胞。
操作步驟：
1、細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：
a．對于貼壁細(xì)胞：小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用消化細(xì)胞，至細(xì)胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細(xì)胞，并輕輕吹散細(xì)胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細(xì)胞。對于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞沉淀不充分，可以適當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞。
b．對于懸浮細(xì)胞：1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細(xì)胞。對于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞沉淀不充分，可以適當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的PBS，以避免吸走細(xì)胞。再次加入1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞。
2、用去離子水按1:3稀釋Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去離子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新懸浮細(xì)胞，調(diào)節(jié)其濃度為 1×106/ml。
4、取 100μl的細(xì)胞懸液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘。
6、在反應(yīng)管中加 400μl PBS，流式細(xì)胞儀(FACS)分析。
Annexin V-Alexa Fluor 488 PI雙染流式分析圖譜
Jurkat細(xì)胞用誘導(dǎo)凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI雙染流式分析圖譜
儲存條件：2～8℃，避光保存
產(chǎn)品名稱 | Alexa Fluor 488/PI細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 | 貨號 | CS-C6050 |
英文名稱 | Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit | 規(guī)格 | 50次 |
本試劑盒是一種采用Annexin V-Alexa Fluor 488與PI雙染法進(jìn)行細(xì)胞早期凋亡分析的檢測試劑盒。
注意事項(xiàng)：
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中，可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法，實(shí)際檢測細(xì)胞活力時通常并不需要檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Annexin V-kFluor488/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 | sMHC-2 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2ELISA檢測試劑盒 |
Alarma Blue細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | PAL 小鼠L苯丙氨解氨ELISA檢測試劑盒 |
PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(IHC法) | Aβ1-4 小鼠β淀粉樣蛋白1-4ELISA檢測試劑盒 |
Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(IHC法) | sCD3L 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原3配體ELISA檢測試劑盒 |
FITC-Brdu細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法) | α2-PI 小鼠α2纖溶抑制物ELISA檢測試劑盒 |
PE-BRDU細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法) | Ub 小鼠泛蛋白ELISA檢測試劑盒 |
APC-Brdu細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法) | CH5 小鼠血清總補(bǔ)體ELISA檢測試劑盒 |
Brdu細(xì)胞增殖檢測試劑盒(IHC法) | α Manase 小鼠α甘露糖苷ELISA檢測試劑盒 |
TUNEL檢測陽性對照制備試劑盒(可配套TUNEL系列試劑盒使用) | ICA 小鼠胰島細(xì)胞抗體ELISA檢測試劑盒 |
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC標(biāo)記POD法,通用) | Gal 小鼠α半乳糖基抗體ELISA檢測試劑盒 |
kFluor647-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式) | D1R 小鼠多巴胺D1受體ELISA檢測試劑盒 |
kFluor647-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(成像) | β Manase 小鼠β甘露糖苷ELISA檢測試劑盒 |
0.1M 硼緩沖液，pH8.4 | BLI 小鼠β內(nèi)酰胺抑制劑ELISA檢測試劑盒 |
細(xì)胞活力檢測試劑盒(96孔熒光計(jì)) | ANG-Ⅱ 小鼠血管緊張ⅡELISA檢測試劑盒 |
細(xì)胞活力快速檢測試劑盒(Luminescent) | TPO 小鼠血小板生成ELISA檢測試劑盒 |
