乙醇酸氧化酶測(cè)試盒_光合作用系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對(duì)研究光呼吸代謝過(guò)程及其調(diào)控具有重要意義。
乙醇酸氧化酶測(cè)試盒_光合作用系列
測(cè)定原理:
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體35mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加10mL雙蒸水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。
酶液提取:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。12000g, 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
注意事項(xiàng):
1.測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
2.色素含量較高的樣品,可在提取酶時(shí)加活性炭吸附。