ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒_淀粉系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應(yīng)生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。
ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒_淀粉系列
測定原理:
AGP催化的逆向反應(yīng)生成G1P,在反應(yīng)體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算AGP活性。
需自備的的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入18mL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10mL蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
粗酶液制備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。