β-淀-粉酶(β-AL)測試盒_淀粉系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
淀-粉酶負責(zé)水解淀粉,主要包括α-淀-粉酶和β-淀-粉酶。β-淀-粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
β-淀-粉酶(β-AL)測試盒_淀粉系列
測定原理:
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。α-淀-粉酶不耐酸,β-淀-粉酶不耐熱。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測出另一種淀-粉酶的活力。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:50mL×1瓶,常溫保存,若有晶體析出,需90℃加熱溶解后再用;
試劑二:40mL×1瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需70℃加熱后再用。
粗酶液提取:
組織:稱取0.1~0.2g樣本(建議稱取約0.1g樣本),加入1mL蒸餾水,研磨勻漿;將勻漿倒入離心管中,提取液在室溫下放置提取15min,每5min振蕩1次,使其充分提??;3000g,25℃離心10min,取上清液加蒸餾水定容至10 mL,搖勻,即淀-粉酶原液。
吸取上述淀-粉酶原液1mL,加入4mL蒸餾水,搖勻,即為淀-粉酶稀釋液,用于(α+β)淀-粉酶總活力的測定。
血清(漿)等液體樣本:(1)直接檢測α-淀-粉酶。(2)吸取淀-粉酶原液1mL,加入4mL蒸餾水,搖勻,即為淀-粉酶稀釋液,用于(α+β)淀-粉酶總活力的測定。
測定步驟:
1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到540 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、試劑一和試劑二40℃預(yù)熱10min。