小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)檢測(cè)試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。
elisa包被,elisa試劑盒包被條件 包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少,僅為直接包被的110乃至于100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時(shí)),以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì),如聚賴氨酸、魚(yú)精蛋白等作預(yù)包被,也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。一套完整的小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)檢測(cè)試劑盒應(yīng)該有哪些呢!
答:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定 中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應(yīng)終止液。
小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
hz-2420E 大鼠鐵蛋白(FE)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2421E 大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2422E 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2423E 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2424E 大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2425E 大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2426E 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2427E 大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2428E 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2429E 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2430E 大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2431E 大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2432E 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2433E 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2434E 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2435E 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2436E 大鼠葉酸(FA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2437E 大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2438E 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2439E 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2440E 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2441E 大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2442E 大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2443E 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2444E 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2445E 大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2446E 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2447E 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2448E 大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2449E 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2450E 大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2451E 大鼠腎素(Renin)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2452E 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2453E 大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2454E 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2455E 大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2456E 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2457E 大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2458E 大鼠腎上腺素(EPI)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2459E 大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2460E 大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2461E 大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2462E 大鼠多巴胺(DA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2463E 大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA kit 血清/組織/尿液