小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。
elisa包被,elisa試劑盒包被條件 包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面,其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大提高,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少,僅為直接包被的110乃至于100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如,在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時(shí)),以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì),如聚賴氨酸、魚精蛋白等作預(yù)包被,也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素生物素系統(tǒng)作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。一套完整的小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒應(yīng)該有哪些呢!
答:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定 中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應(yīng)終止液。
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
hz-2464E 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2465E 大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2466E 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP) ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2467E 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP) ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2468E 大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2469E 大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2470E 大鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2471E 大鼠apelin 12(AP12)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2472E 大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2473E 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2474E 大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2475E 大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2476E 大鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2477E 大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2478E 大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2479E 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2480E 大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2481E 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2482E 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2483E 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2484E 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2485E 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2486E 大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2487E 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2488E 大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2489E 大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2490E 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2491E 大鼠丙二醛(MDA)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2492E 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2493E 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2494E 大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2495E 大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2496E 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2497E 大鼠胰淀素(Amylin)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2498E 大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2499E 大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2500E 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2501E 大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2502E 大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA kit 血清/組織/尿液
hz-2503E 大鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA kit 血清/組織/尿液