網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)液
一、原理:
網(wǎng)織紅細(xì)胞(Reticulocyte Ret)是一種幼稚的無核紅細(xì)胞,其胞漿中仍殘留有嗜堿性的核糖核蛋白痕跡,可被堿性染料在活體時染色。
二、試劑組成:
R1:網(wǎng)織紅細(xì)胞染色貯備液 16mL×1 瓶,4℃保存。
R2:網(wǎng)織紅細(xì)胞染色稀釋液 60mL×1 瓶,4℃保存。
三、染色:
1、取一小試管或塑料小離心管,加入 R1 網(wǎng)織紅細(xì)胞染色貯備液 100μ1,再加等量全血混勻。37℃或室溫孵育 15~20min,制備成 A 混合液。
2、取此 A 混合液 20μL,再加 2 倍體積 R2 網(wǎng)織紅細(xì)胞染色稀釋液 40μL 混勻,制備成 B 混合液。
3、從 B 混合液中取 3μL 推成薄片,待干。
4、不需固定或復(fù)染,直接用油鏡計數(shù)。
四、計數(shù)方法:
1、計數(shù) 1000 個紅細(xì)胞中含有多少網(wǎng)織紅細(xì)胞,最后按百分比報告。
2、也可用 Mi1ler 窺盤數(shù) 1000 個紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞(Reticu1ocyte Ret)的數(shù)量,最后按百分報告。
五、注意事項
注 1:建議取樣后在短時間內(nèi)及時操作計數(shù)。
注 2:網(wǎng)織紅細(xì)胞比一般紅細(xì)胞略大,故在涂片的尾部和兩邊分布較多,因此在計數(shù)時要兼顧到這些區(qū)域。
注 3:點彩紅細(xì)胞和脾切除后鐵粒小體(Pap-penheimer 體),在本法均已計入,不能區(qū)別。
注 4:本試劑盒僅用于科研。
網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)液