小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
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ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
?。ㄒ唬╇p抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
?。?/span>1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
?。?/span>3)加酶標抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
?。?/span>4)加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結(jié)合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
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