小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽（ENA-78）ELISA試劑盒

樣品處理程序（樣品在提取過(guò)程中，要嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，提取過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋，否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存）
取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液
強(qiáng)力振蕩3分鐘
用Whatman 濾紙過(guò)濾
取25µl處理后的樣品，加入25µl*于反應(yīng)孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）
酶免分析步驟
實(shí)驗(yàn)須知
 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫（25±2℃），時(shí)間約2小時(shí)。回溫至室溫（25±2℃）后再取出微孔條，多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注：一定保證回溫充分，否則影響檢測(cè)的精確度和準(zhǔn)確度。
 使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存
 請(qǐng)不要改變分析程序
 請(qǐng)使用精確的微量移液器
 操作一旦開(kāi)始，請(qǐng)不要中斷任何程序
 ELISA結(jié)果的可重復(fù)性*程度的取決于操作程序，請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作
 為避免交叉污染，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
 加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
 分析步驟
預(yù)*行編號(hào)，標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置，*進(jìn)行雙孔檢測(cè). 取所需數(shù)量的微孔（微孔條可拆），將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
 樣品稀釋液（10×）、濃縮洗滌液（10×）稀釋成工作液（蒸餾水或去離子水稀釋）
 在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
 在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
 在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
 在所有孔中加入50µl的抗總*抗體酶結(jié)合物
 輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。
37℃溫浴30min （溫浴過(guò)程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板，可以減少雙孔誤差）
 甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔板5次，zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
 反應(yīng)洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50µl顯色液A，再加 50µl顯色液B；輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻
 37℃溫浴10min
 每孔中加入50µl終止液，混勻
 在450nm下檢測(cè)吸光度，結(jié)果在5min內(nèi)讀取。

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