犬免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
強(qiáng)力振蕩3分鐘
用Whatman 濾紙過濾
取25µl處理后的樣品,加入25µl*于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)
酶免分析步驟
實(shí)驗(yàn)須知
實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)。回溫至室溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測(cè)的精確度和準(zhǔn)確度。
使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存
請(qǐng)不要改變分析程序
請(qǐng)使用精確的微量移液器
操作一旦開始,請(qǐng)不要中斷任何程序
ELISA結(jié)果的可重復(fù)性*程度的取決于操作程序,請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作
為避免交叉污染,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
分析步驟
預(yù)*行編號(hào),標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,*進(jìn)行雙孔檢測(cè). 取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
在所有孔中加入50µl的抗總*抗體酶結(jié)合物
輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。
37℃溫浴30min (溫浴過程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)
甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
反應(yīng)洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻
37℃溫浴10min
每孔中加入50µl終止液,混勻
在450nm下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。
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ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,
可概括四個(gè)方面:
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。
Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。指標(biāo)齊全elisa試劑盒供給科研單位實(shí)驗(yàn)研究,高校發(fā)布文獻(xiàn),可提供免費(fèi)代檢測(cè),一周出數(shù)據(jù),公司具有國內(nèi)外的技術(shù)水平,更好的售后服務(wù)和優(yōu)質(zhì)的解決方案,為您提供高品質(zhì)高服務(wù)高創(chuàng)新的產(chǎn)品。
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