雞5核苷酸酶（5-NT）ELISA試劑盒

卡邁舒（上海）生物科技在線客服：/ 2321925109

實(shí)驗(yàn)原理

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。

有效期：6個(gè)月

預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

說(shuō)明

1．試劑盒保存：-20℃（較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）；2-8℃（頻繁使用時(shí)）。

2．濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

3．中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不*之處，請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

4．剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

試劑盒組成及試劑配制

1.         酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2.         標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3.         樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4.         *標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5.         辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6.         *標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7.         辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8.         底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9.         濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10.     終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行

檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

液體類(lèi)標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1. 血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

3. 尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

公司其他相關(guān)產(chǎn)品發(fā)布：

雞肌紅蛋白（MYO）ELISA試劑盒        Chicken MYO ELISA Kit
雞脂聯(lián)素（adiponectin）ELISA試劑盒        Chicken adiponectin ELISA Kit
雞分泌型IgA（sIgA）ELISA試劑盒         Chicken sIgA ELISA Kit
雞脂多糖（LPS）ELISA試劑盒        Chicken LPS ELISA Kit
雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3（TRAIL-R3）ELISA試劑盒  Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit
雞孕激素（estrogen）ELISA試劑盒        Chicken estrogen ELISA Kit
雞E選擇素（E-Selectin）ELISA試劑盒        Chicken E-Selectin ELISA Kit
雞甲狀旁腺激素（PTH）ELISA試劑盒        Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
雞白三烯C4（LTC4）ELISA試劑盒        Chicken Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit
雞17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒        Chicken Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit
雞熱休克蛋白60（Hsp60）ELISA試劑盒        Chicken Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
雞白介素8（IL-8）ELISA試劑盒         Chicken IL-8 ELISA Kit
雞纖維膠凝蛋白3（FCN3）ELISA試劑盒         Chicken FCN3 ELISA Kit
雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽（PPP）ELISA試劑盒           Chicken Hen egg phosvitin phosphopeptides,PPP ELISA Kit
雞卵黃免疫球蛋白（IgY）ELISA試劑盒           Chicken Hen egg Immunoglobulin of Yolk,IgY ELISA Kit
雞胰高血糖素（GC）ELISA試劑盒        Chicken Glucagon,GC ELISA Kit
雞抗肌內(nèi)膜抗體IgA（EMA IgA）ELISA試劑盒        Chicken anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit
雞核因子κB（NF-κB）ELISA試劑盒        Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit