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人肥大細(xì)胞類*(MCT)ELISA試劑盒

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更新時間:2016-09-24 11:53:37瀏覽次數(shù):267次

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人肥大細(xì)胞類*(MCT)ELISA試劑盒
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人肥大細(xì)胞類*(MCT)ELISA試劑盒

樣品收集、處理及保存方法
1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、組織、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

說明

1.試劑盒保存:2-8

2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

3.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。

4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD,計算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1.         酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96。

2.         標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)2凍干品。

3.         樣品稀釋液(Sample Diluent)1×20ml/瓶。

4.         *標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent)1×10ml/瓶。

5.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent)1×10ml/瓶。

6.         *標(biāo)記抗體(Biotin-antibody)1×120μl/(1100)

7.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin)1×120μl/(1100)

8.         底物溶液(TMB Substrate)1×10ml/瓶。

9.         濃洗滌液(Wash Buffer)1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10.     終止液(Stop Solution)1×10ml/(2N H2SO4)。

 

注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本收集后應(yīng)立即離心后保存。

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