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人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒

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所在地上海市

更新時間:2016-04-04 01:56:53瀏覽次數(shù):225次

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“人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒"血漿:
應根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。

人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 實驗原理:
用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

產(chǎn)品英文:Human Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit

產(chǎn)品用途:僅供科研使用

檢測范圍:15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml
特 異 性:本試劑盒可同時檢測重組或天然的,且與其它相關蛋白無交叉反應

人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1、 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?100 ,余孔分別加標準品或待測樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣 時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時。為保證實驗結果有效
性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2、 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標板加上覆膜,37 溫育1小時。
3、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4、 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時。
5、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、 每孔加底物溶液90 ,酶標板加上覆膜37 避光顯色(反應時間控制在15-30分鐘,當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯時,即可終止)。
7、 每孔加終止溶液50 ,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物 液的加入順序相同。
8、 立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。

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