前列腺素E受體3抗體,EP3,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購(gòu)。
前列腺素E受體3抗體,EP3,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時(shí)標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個(gè)目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個(gè)抗體是不同的二抗.在兩個(gè)目的片段相差小于5KD時(shí),就需要經(jīng)過(guò)處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過(guò)比較貴,zui簡(jiǎn)單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個(gè)抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個(gè)10個(gè)不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度:轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時(shí))(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時(shí)花很多時(shí)間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時(shí)候根本沒(méi)有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動(dòng),現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個(gè)平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時(shí)間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時(shí)間為1小時(shí),大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過(guò)本人覺(jué)得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過(guò)去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過(guò)我們?cè)囘^(guò)幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國(guó)產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-0659R 腸致病性大腸桿菌抗體 EPEC/E.coli
Ys-2100R 抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體 E.coli/EPEC
Ys-1555R 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139) E.coli O139
Ys-1876R 前列腺素E受體3抗體 EP3
Ys-1763R EphA1抗體 Ephrin A1
Ys-1764R *蛋白激酶A4抗體 EphA4
Ys-2764R Ephrin B抗體 Ephrin B
Ys-3217R 磷酸化Ephrin B抗體 phospho-Ephrin B (Tyr331)
Ys-3167R 磷酸化Ephrin B抗體 phospho-Ephrin B (Tyr317)
Ys-3128R 磷酸化Ephrin B抗體 phospho-Ephrin B (Tyr298)
Ys-3129R 磷酸化Ephrin B抗體 phospho-Ephrin B (Tyr324/329)
Ys-0485R 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白*激酶抗體 EphA2/Eph receptor A2
Ys-3126R 磷酸化*蛋白激酶A2受體抗體 Phospho-EphA2 (Tyr594)
Ys-1455R *蛋白激酶A4受體抗體 EphA4 R
Ys-0247R EphB2 R抗體 EphB2 R
Ys-1424R 紅細(xì)胞生成素受體抗體 EPOR
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