內(nèi)皮細胞受體蛋白*激酶抗體,EphA2，
產(chǎn)品類型 一抗
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內(nèi)皮細胞受體蛋白*激酶抗體,EphA2，Western的經(jīng)驗：
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了（Re-Blot）,有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置）,也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋（-70度>3小時）（Bio-Rad）,這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.（不信的可以試試!!）
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
，部分相關(guān)產(chǎn)品：
Ys-0485R 內(nèi)皮細胞受體蛋白*激酶抗體 EphA2/Eph receptor A2
Ys-3126R 磷酸化*蛋白激酶A2受體抗體 Phospho-EphA2 （Tyr594）
Ys-1455R *蛋白激酶A4受體抗體 EphA4 R
Ys-0247R EphB2 R抗體 EphB2 R
Ys-1424R 紅細胞生成素受體抗體 EPOR
Ys-2571R *蛋白激酶受體B6抗體 EphB6
Ys-0725R 雌激素受體α抗體 ER-alpha
Ys-0021M 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 ERAB
Ys-1726R DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 ERCC1
Ys-0022R 絲裂原活化蛋白激酶1抗體 ERK2/MAPK1
Ys-1736R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 phospho-MEK1/MAPKK1（Ser298）
Ys-3269R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 phospho-MEK1 （Thr286）
Ys-3270R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 Phospho-MEK1/2 （Ser217/221）
Ys-3722R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 Phospho-MEK1/2 （Ser221）
Ys-1522R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 phospho-ERK1/MAPK-1/2（Thr183/185）
Ys-1645R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 phospho-ERK1（Thr202/Tyr204）
Ys-2637R 絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 ERK1/2（p44/42 MAPK）

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