上皮特異性抗原抗體,EpCAM/CD326,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
上皮特異性抗原抗體,EpCAM/CD326,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1020R 絲裂原活化蛋白激酶3抗體 ERK1/MAPK3
Ys-1319R 絲裂原活化蛋白激酶4抗體 MAPK4
Ys-1851R 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 DUSP1/MKP-1
Ys-3278R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 Phospho-MKP1 (Ser359)
Ys-3279R 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)
Ys-1852R 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗體 MKP-2/DUSP4
Ys-0122R 雌激素受體α抗體 ER-alpha
Ysm-1591M ER/PR/c-erbB-2檢測試劑盒(鼠單抗) ER/PR/c-erbB-2 Kit(mo monoclonal)
Ys-0894R 磷酸化雌激素受體ER alpha 抗體 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)
Ys-1643R 磷酸化雌激素受體α抗體 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)
Ys-3130R 磷酸化雌激素受體α抗體 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)
Ys-3131R 磷酸化雌激素受體α抗體 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106)
Ys-0254R 雌激素受體α抗體(用于western blot) ER-Alpha
Ys-2098R 雌激素受體α抗體 ER-Alpha
Ys-0174R 雌激素受體α/β抗體 ER-alpha/beta
Ys-0116R 雌激素受體β 抗體 ER-beta
Ys-0255R 雌激素受體β抗體 ER-Beta
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