脆性*三聯(lián)體抗體,FHIT,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
脆性*三聯(lián)體抗體,FHIT,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復(fù)標記和再標記:一張膜上可以同時標記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標記了(Re-Blot),有些公司有再標記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1536R 促卵泡刺激素抗體 FSH
Ys-1769R 脆性*三聯(lián)體抗體 FHIT
Ys-3146R 磷酸化脆性*三聯(lián)體抗體 Phospho-FHIT (Tyr114)
Ys-0348R G蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體 G protein beta subunit GI
Ys-3519R *蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體 SLK/Fyn
Ys-2252R 兔抗γ1氨基丁酸抗體 GABA
Ys-2770R 接頭蛋白Gab 1抗體 Gab1
Ys-3165R 磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體 Phospho-Gab1 (Tyr627)
Ys-3166R 磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體 Phospho-Gab1 (Tyr659)
Ys-2885R 接頭蛋白Gab 2抗體 Gab2
Ys-3177R 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 phospho-GAB2(Ser623)
Ys-3178R 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體 phospho-GAB2 (Tyr452)
Ys-3182R 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 phospho-GAB2 (Tyr643)
Ys-3183R 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體 phospho-GAB2 (Ser623)
Ys-1232R G1氨基丁酸A型受體α1抗體 GABRA1
Ys-0533R gamma氨基丁酸B型受體1抗體 GABABR1
Ys-1293R G氨基丁酸B型受體2抗體 GABABR2/GB2
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