丙型肝炎病毒-NS1抗體,HCV-NS1,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
丙型肝炎病毒-NS1抗體,HCV-NS1,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-0218R 丙型肝炎病毒-NS1抗體 HCV-NS1
Ys-0219R 丙型肝炎病毒-NS3抗體 HCV-NS3
Ys-0213R 丙型肝炎病毒-NS4a抗體 HCV-NS4a
Ys-1186R 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體 CD36L1/SRB1
Ys-0408R 血紅素抗體 Heamachrome
Ys-1831R HER2受體抗體 HER2/c-erbB2
Ys-2048R HER2受體抗體 HER2 receptor
Ys-2155R HER2受體抗體 HER2 receptor(NT)
Ys-2156R HER2受體抗體(N端) HER2 receptor(NT)
Ys-3212R 磷酸化HER2受體抗體 Phospho-HER2(Tyr1221/1222)
Ys-3213R 磷酸化HER2受體抗體 Phospho-HER2(Tyr1112)
Ys-3214R 磷酸化HER2受體抗體 Phospho-HER2(Tyr1248)
Ys-2896R 磷酸化HER2受體抗體 Phospho-HER2 (Tyr877)
Ys-2897R HER3受體抗體 HER3/ErbB3
Ys-3218R 磷酸化HER3受體抗體 Phospho-HER3 (Tyr1197)
Ys-3219R 磷酸化HER3受體抗體 Phospho-HER3 (Tyr1222)
Ys-3491R 磷酸化HER3受體抗體 Phospho-HER3 (Tyr1289)
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