丙酮酸激酶-M2抗體,M2-PK/PKM2,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購。
丙酮酸激酶-M2抗體,M2-PK/PKM2,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時(shí)標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個(gè)目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個(gè)抗體是不同的二抗.在兩個(gè)目的片段相差小于5KD時(shí),就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡(jiǎn)單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個(gè)抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個(gè)10個(gè)不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度:轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時(shí))(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時(shí)花很多時(shí)間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時(shí)候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動(dòng),現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個(gè)平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時(shí)間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時(shí)間為1小時(shí),大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們?cè)囘^幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-2906R 膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 Lyn
Ys-3256R 膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 Phospho-Lyn (Tyr507)
Ys-3257R 磷酸化膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 Phospho-Lyn (Tyr396)
Ys-3258R 磷酸化膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體 Phospho-Lyn (Tyr497)
Ys-1311R 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 LYVE-1
Ys-0101R 丙酮酸激酶-M2抗體 M2-PK/PKM2
Ys-3334R 磷酸化丙酮酸激酶M2抗體 Phospho-PKM2 (Tyr105)
Ys-0101M 丙酮酸激酶-M2 M2-PK (pyruvate Kinase M2)
Ys-2217R 整合素alpha E2 抗體 Integrin alpha E2
Ys-1804R 整合素αL抗體 Integrin alpha L/CD11a
Ys-1014R 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 CD11b/CD49d
Ys-2508R 整合素αX抗體 Integrin Alpha X/CD11c
Ys-2659R 巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體 MARCO
Ys-2909R *蛋白激酶C底物Marcks抗體 MARCKS
Ys-3263R 磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體 Phospho-MARCKS (Ser152/156)
Ys-3359R 磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體 Phospho-MARCKS (Ser162)
Ys-1595R Mad1抗體 MAD1
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